iPS分化了吗？

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' c5 n4 D! m9 m; s8 yhiPSC克隆周围的细胞也是iPS吗？
5 h: V, T% l- Qhttp://www.stemcell8.cn/thread-53304-1-1.html5 p1 Z+ ?/ {7 j4 H
多人说我的iPS已分化了，心急啊# T0 k- ]5 ^! X2 t1 w& i9 C

. _& g7 Y7 a6 @8 b  y我原先是feeder培养，现在换培养基了，feeder-free培养，转换后约6天的图片如图

荣荣荣

我以前机械法将细胞挑出来的时候，就是这个样子，过一段时间就展开了，即使不展开又用胰酶消化继续传代就好了。

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回复 lchanlon 的帖子% s- h# X* M9 v% P- p) {; r

% S5 s$ t1 n. N& p' _加了

lchanlon

你是不是加了ROCK inhibitor啊，如果没加的话应该是分化了。

Jonathan

回复 song58 的帖子
6 z2 u3 J3 c8 R; I( _  B
7 R  ]# g* X* T* R1 z你不要在这里误导他了。你画圈的这些克隆，没有一个好的。应该说，LZ的图片里面，没有好的克隆。基本都分化了。如果是我，就扔了。重新做。

murry

周围已经分化了。污染了的细胞应该立刻马上处理掉！再放在培养箱内，或者打开盖子的话，很可能会把细胞房的环境污染掉！那就杯具了！

dianying

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9 t0 }' R9 C# W# d+ Z& ?  S$ Q# P9 K/ r+ m
你确定是黑孔吗？如果是上面的一层膜，你可以试着拿针剥离开，看看底下的要是没分化，就还可以把它传代。

wangyimei

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6 |# s3 L/ V- G: H' j3 b
* |' |& x1 F; @啊，这样啊，状态看着不是很好啊，看看从哪买来的，找他们的人问问看

sunny2829

回复 573639471 的帖子! O) o  }8 n6 r$ P9 V$ v0 S

& G6 g; S. _' G& Q/ }" k$ _) I; W- I个人认为那是未完全重编程的克隆，多层细胞，边缘细胞为不规则多边形，形态上与典型的ES克隆差别挺大的。

katysong

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( q4 e1 q' ~# R: E% X* @' h8 N( Q
4 m- Q! N3 d. k- J; |8 Q* |: S- s培养干细胞很多时候都要用机械法传代的，挑取好的克隆或是把已分化的克隆刮掉，有几种比较典型的分化情况分享一下：* r( i( j6 h' e  x. ~* O9 I
1. 克隆团中间塌陷，形成“孔状”，中间即为分化的细胞；8 o: E1 V3 _: L) j# [
2. 网状结构，不够致密，可能来源于已分化的干细胞或是上次传代残留的Feeder；6 i' N  v+ k  ]# L* X/ F7 b" H
3. 有中间隆起的发黑的细胞团应该是已经分化并死亡的细胞（个人感觉楼主的细胞有这种情况，应该之前就应该传代的，时间稍微晚了一点）；
. f6 h0 j' x" ^4. 还有一些克隆状态不好的，边缘会比较“混乱”，中间细胞形态也不均一，也应该舍弃；
. W1 W* ]/ u- \0 t% l( B3 [6 A或许有不对的地方，希望对您的实验有所帮助……