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包包
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楼主
发表于 2012-3-20 01:27 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
新手一名,麻烦各位师兄,可以给我一些意见。
, f' k% j; S( f+ }) L9 ]8 {: G" [- a- k
我想问一下,如果要换液,请问是用离心方法好,还是直接加一半新的液好?! @" j  q. k. I, w, Z& C; ^% t

$ C. |) o7 R3 n/ a6 m4 ~谢谢
$ C: j/ D# Y2 v+ V7 U
2 T9 r: d' w1 A4 U; B7 A& n. @2 }. i, P0 ]' l5 Q# d9 H
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沙发
发表于 2012-3-20 08:36 |只看该作者
直接加新的试试。
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藤椅
发表于 2012-3-20 08:38 |只看该作者
直接加也比较好,好多文献上都是这么做的
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板凳
发表于 2012-3-20 08:51 |只看该作者
你可以根据具体情况:1、如果细胞培养天数不多,如2-3天,且培养液未达到瓶口(容易污染的地方),可以采取半量换液,也就是加新的液体进去。2、如果培养天数较多,到了该传代的时间,那就要离心传代全量换液了。3、根据细胞生长情况,对数生长期的细胞建议半量换液,过了这个时期就要传代全换了。一定要自己多观察,总结经验,多试验。以往的文献仅供参考,不可全部照搬照抄啊。摸索出来适合自己的的就是最好的。学无止境,实验也用无定论,哈哈,仅供参考。
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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2012-3-20 08:56 |只看该作者
你的图片看过了,也只是一个视野里面的细胞,第一张图看细胞球(大的和小的)比例基本各占一半,应该不算“老化”,应该半量换液就可以,但具体情况还要靠自己去观察,去摸索。只有自己才能看到最全面最真实的情况,别人的(包括我的),仅供参考,祝顺利!
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地板
发表于 2012-3-20 10:14 |只看该作者
半量换
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7楼
发表于 2012-3-20 10:40 |只看该作者
这个最好还是要看细胞的状态吧,如果你觉得碎片比较多,你就可以全量换一下,如果碎片不多,可以考虑半量换液,个人意见哈
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发表于 2012-3-20 13:40 |只看该作者
我觉得不用换,直接加新液就行。你在培养瓶还是袋里?
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9楼
发表于 2012-3-21 00:31 |只看该作者
谢谢各位师兄的意见!!
: N, j+ c/ n( F1 k. b/ r& t( t) ~( r
我还有几个问题想问一下:5 V5 O6 J' q9 Q8 z, ~% N& e8 f

; W3 k! [- ~4 @/ c0 y1.        我在文献中看到,很多时候都是说可以增值200-300倍,我想了解是CIK细胞数目增加,还是其他单核细胞都会增加?
" Y. r5 f0 k/ w5 _, V6 P! d
2 n  h( N8 L2 Q/ _: D2.        在图中,有一团团的黑色东西是什么来?要弄散吗?
" e/ S+ z- t" N; P# ^9 \  m, Y5 W$ O  Z! B
3.        在文献中,有些说换液时有加Anti-CD3,有需要补充吗?" B+ i0 E  [7 H! s' t; A) Z

1 S6 a" w/ m+ y: l+ h4.        可不可以在显微镜下看培养皿决定要不要换液?4 [4 J1 m$ F1 \$ z( J* @
; h6 }9 ]. d7 R1 F9 c$ O
5.        我在培养的时间,过了好几天,培养液都没有变色,我应该根据3-4天换液,还是等待培养液变色?" d0 H9 l+ e- m' L4 q
' G+ X) _4 I. b! A2 W% v- O
谢谢% L7 ]8 q% z, u" e6 v
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10楼
发表于 2012-3-21 00:56 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-3-21 00:57 编辑
( C- y. @: @9 `
) I1 {9 B+ U3 Q( N1 j$ C8 a回复 冠忠 的帖子
7 V' ?' M  k6 }5 K" t. A8 y# Y) I8 K# |7 a# \
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