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请教酶消化法培养脐带间充质干细胞的问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-3-20 08:16 |只看该作者 |正序浏览 |打印
我用的是0.1%二型胶原酶消化4小时,0.25%胰酶消化30min,但是细胞养几天就死了,请问是不是胰酶消化时间太长,过度消化所致啊?
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发表于 2014-9-1 11:28 |只看该作者
我们一般用现成的胰酶,方便快速,你们用什么培养基中和啊?
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发表于 2014-9-1 09:09 |只看该作者
用一型和透明质酸酶混合试试
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发表于 2014-8-28 22:51 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 pailishi 的帖子4 m0 V/ s' [, y( H$ x  K# d
  o2 M5 M) ~3 h7 s
请问使用哪三种酶以及浓度、用量。
- F. e2 n3 w' x$ Z/ [, d/ R. J6 ?

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金话筒 优秀会员

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发表于 2014-7-12 10:51 |只看该作者
回复 2013sp 的帖子
5 F# T5 o4 v0 B1 @( l7 I- n# G  J9 C3 Q' k( X6 }; Z  i$ W- [
自己去查别人的硕士毕业论文吧,详细得很

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发表于 2014-7-12 10:33 |只看该作者
回复 pailishi 的帖子
) p$ P, F4 O( R% ?. K
( m  Q$ S! N% F/ y; a用哪三种酶消化,三种酶的浓度与加的量各是多少??????求教,谢啦!!!!

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发表于 2014-7-11 20:10 |只看该作者
回复 pailishi 的帖子3 z8 B& P0 C! C
$ J3 S$ N+ J- H" r" j, Y: i
跪求酶消化法培养脐带间充质干细胞的操作步骤。

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发表于 2014-7-11 20:10 |只看该作者
回复 pailishi 的帖子
5 m8 e0 t3 N. v
" n( ?/ v. b  H: d3 j& J1 G$ L跪求酶消化法培养脐带间充质干细胞的操作步骤。

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发表于 2012-5-24 15:38 |只看该作者
开始培养脐带间充质MSC时,我用0.1%的I型胶原酶消化,消化过后没有用PBS大量稀释、清洗,细胞受损伤,虽然有大量的细胞,但是由于有胶原酶附着,细胞也被消化了。组织块培养7-10天,就有MSC从组织块爬出,更容易得到MSC,为什么要用酶消化法?
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发表于 2012-5-23 22:41 |只看该作者
回复 细胞干 的帖子9 C: A/ \, R3 _( Q1 v( J

. M" C) J/ v3 ]. m# Q我一般的做法是不是全把上清去掉,慢慢吸,剩下最底下的1-2ml,这样保证细胞不会被倒掉。+ K; U3 ~1 e3 H* W
我之前做过拿胰酶消化的,感觉效果不明显,还增加了步骤和污染的机会,所以没用胰酶了,感觉也挺好的,应该是先过滤再离心,这样大的组织块就可以先去掉了
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