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请教酶消化法培养脐带间充质干细胞的问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-3-20 08:16 |只看该作者 |正序浏览 |打印
我用的是0.1%二型胶原酶消化4小时,0.25%胰酶消化30min,但是细胞养几天就死了,请问是不是胰酶消化时间太长,过度消化所致啊?
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发表于 2014-9-1 11:28 |只看该作者
我们一般用现成的胰酶,方便快速,你们用什么培养基中和啊?
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发表于 2014-9-1 09:09 |只看该作者
用一型和透明质酸酶混合试试
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发表于 2014-8-28 22:51 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 pailishi 的帖子
9 R: [) y; @8 ^' m& \$ X6 {0 q8 y
请问使用哪三种酶以及浓度、用量。
# [7 L# C% o. ~  ]% E

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金话筒 优秀会员

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发表于 2014-7-12 10:51 |只看该作者
回复 2013sp 的帖子
" P' O; `/ \$ @" c3 u% b- ~8 b7 B; Y% g5 ~, S
自己去查别人的硕士毕业论文吧,详细得很

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发表于 2014-7-12 10:33 |只看该作者
回复 pailishi 的帖子
& j, R0 C: I" X0 B0 ~% }8 u" t2 O& {' \9 u8 d* O
用哪三种酶消化,三种酶的浓度与加的量各是多少??????求教,谢啦!!!!

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发表于 2014-7-11 20:10 |只看该作者
回复 pailishi 的帖子4 z6 |4 a6 M- R# [5 u6 R1 q, b/ c

: y9 W; N1 L: h, l$ l& W跪求酶消化法培养脐带间充质干细胞的操作步骤。

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15
发表于 2014-7-11 20:10 |只看该作者
回复 pailishi 的帖子
2 A" ^$ j: p# g' Y% n4 f$ B- p* [* s3 a5 }7 X
跪求酶消化法培养脐带间充质干细胞的操作步骤。

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发表于 2012-5-24 15:38 |只看该作者
开始培养脐带间充质MSC时,我用0.1%的I型胶原酶消化,消化过后没有用PBS大量稀释、清洗,细胞受损伤,虽然有大量的细胞,但是由于有胶原酶附着,细胞也被消化了。组织块培养7-10天,就有MSC从组织块爬出,更容易得到MSC,为什么要用酶消化法?
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发表于 2012-5-23 22:41 |只看该作者
回复 细胞干 的帖子
, L' z2 i2 Y3 E& B8 v0 w, |# e
4 b1 x2 W' g- K' D我一般的做法是不是全把上清去掉,慢慢吸,剩下最底下的1-2ml,这样保证细胞不会被倒掉。
: x8 c% c4 Q, o我之前做过拿胰酶消化的,感觉效果不明显,还增加了步骤和污染的机会,所以没用胰酶了,感觉也挺好的,应该是先过滤再离心,这样大的组织块就可以先去掉了
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