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楼主: YLL824WAN
go

关于MEF饲养层,急急急!   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-4-15 22:54 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
  本人最近实验频频出问题,很是烦躁啊!望高人指点:之前用昆明白做的MEF饲养层细胞,养到第三代时用丝裂霉素C处理后冻存,用的是60%DMEM+30%FBS+10%DMSO,最近复苏了9管,只有5管贴壁,另外4管一点都没贴,肉眼观可见培养基呈黄色浑浊,还可见白色小絮状一样的漂浮物。给贴壁的5管换液后开始每天收集条件培养基,可才到第4天,培养皿中培养基镜下看全为泥沙似的东西,很细密,细胞形态也变得不一样了,肉眼观也是黄色浑浊一片,用PBS反复洗了4次后换液,第二天又成那样了。后来又复苏了两次,也都是不贴壁,但这些细胞不是一次冻存的,而且冻存方法应该没问题,真的很不解啊!各位大侠都来指点一下哦!感激涕零啊!
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沙发
发表于 2012-4-16 15:06 |显示全部帖子
啊???完了……好的,谢谢各位啦!我赶紧处理去。

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藤椅
发表于 2012-4-24 10:54 |显示全部帖子
回复 雪国叶子 的帖子# N8 E4 V3 B5 h1 s  W+ L  |5 L

& n( M, O( S5 `9 R$ M  j8 a好的,学习了,多谢啊
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