脐带间充质细胞传代问题

henryjia

  y" C6 ~0 C0 A: ]
) z1 w8 t5 A, ^
我的脐带间充质细胞似乎P0传代消化有问题。但是一旦到T75培养瓶后似乎就消化的很快了。不知道大家是否有同样问题？

Tim

回复 henryjia 的帖子
  s! ~# z2 m- y6 \5 B
# l# B* y9 c2 r7 Z" X7 {1 @在外界条件没变得的情况下，只是培养瓶变化吗?是一个厂家的吗?感觉是心理原因

shizhu198511

回复 henryjia 的帖子  R0 C/ Z' u3 }9 |2 K/ H# P
0 ?2 o7 ?0 ^# F# X
感觉你的细胞形态很不错了，和买的成品间充质干细胞培养基做出来的差不多，我的细胞比较粗大，请问你原代的血清浓度是多少？我的是10%，感觉原代就变得又宽又大了

menghy

细胞消化传代根据你细胞的密度，活性来决定，还有就是所用酶是否有变化。
' g* }% `  x# l, _' p按道理更换培养瓶是不会出现细胞消化时间缩短的。你要看你培养条件和以前的相比是不是有改变的地方。

henryjia

我感觉和更换培养瓶无关，大家可能误会我的意思了。我不是想说因为更换培养瓶而发生。我想探讨是不是传代的原因-从P0到P1，P2细胞发生某些变化，反应带对于消化酶的敏感性？谢谢大家关注。

千里草

个人觉得P0代的细胞可能长梭形比较明显 在后面的传代过程中细胞逐渐变短，这可能跟传代后细胞的活性变化有关，因为传代次数越多，间充质的特性回发生变化。当然，也要适当掌握消化酶的作用时间及浓度等因素。

chrismine

形态还行的，P0代时候个人感觉需要注意的就是一个消化时间问题，一个就是存在分化的问题吧。P0的细胞感觉很脆弱，分化的时间需要掌握好。时间稍微一长的话就会造成细胞壁变薄的情况。分化问题上，传代的时候你的MSC会随着你得传代次数出现分化的，这个很正常，如果你要是留有照片的话就会发现原代细胞形态和传代几次后细胞形态有差异。不过这影响不大。

haibara007007

你提到的是不是p0代比传代后消化时间更长？其实这是很正常的，因为刚消化完p0代的细胞比较杂，干细胞的含量也比较低，所以消化时你会感觉比较长，经过传代后，细胞得以纯化，消化时间当然明显变短了，也是很正常的，你的细胞形态不错的。

nankou2008

照片是几代啊？形态很好了 我做的 到第三代就变大了 都不是长梭形了

tanrufu

消化时间长短应该跟你所用的消化的胰酶的酶效和细胞生长密度有很大关系吧，应该与培养材料不存在大的关系。看你的图片，细胞状态很好啊。还有就是P0代细胞培养中本身就含杂比较多，往下传细胞相对纯化得多。你说得这种情况应该是正常现象吧