错在哪一步，望赐教！------谈脐血分离MSC

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具体步骤是：脐血稀释---红细胞裂解液裂解稀释后的脐血---取上清液-----再用密度梯度离心----吸取白膜层（白膜层不是很明显）---PBS洗两便---一部分养在DMEM中想得到MSC，另一部分养在EGM中为了得到EPC（用的是培养瓶，没有铺胶）------可三天后换液（换液时没有发现贴壁的细胞）------换液2天后发现瓶中仍没有贴壁的细胞。结果什么也没培养出来，步骤中哪一步错了，望赐教！

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回复 Roden 的帖子
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这周二又做了一次，干脆把脐血稀释之后直接密度梯度离心，而且离心后也见到白膜层了，但今天还是没有见到贴壁细胞。

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回复 camus 的帖子& [! x/ r9 s* p
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没发现有贴壁的，不知道为什么？

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回复 meister 的帖子- R* _7 W, i* ?$ y( ]+ A
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这周二又做了一次，干脆把脐血稀释之后直接密度梯度离心，而且离心后也见到白膜层了，但今天还是没有见到贴壁细胞

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回复 henryjia 的帖子6 O1 m8 R* e! |1 X! K- ~! V0 [

! F8 t+ t4 T  A8 _$ u养EPC是不是一定要铺层？我一般用的是培养瓶，听说瓶底一般有铺层，有时最多用多聚赖氨酸铺一下罢了！这对培养出EPC细胞的影响大吗？

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回复 henryjia 的帖子. M2 I& L2 p+ N' N8 C& \- r3 r
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你指的是取原代时不铺层吗？