错在哪一步，望赐教！------谈脐血分离MSC

542177563

具体步骤是：脐血稀释---红细胞裂解液裂解稀释后的脐血---取上清液-----再用密度梯度离心----吸取白膜层（白膜层不是很明显）---PBS洗两便---一部分养在DMEM中想得到MSC，另一部分养在EGM中为了得到EPC（用的是培养瓶，没有铺胶）------可三天后换液（换液时没有发现贴壁的细胞）------换液2天后发现瓶中仍没有贴壁的细胞。结果什么也没培养出来，步骤中哪一步错了，望赐教！

sdwzg119

要说脐血MSC的话，一般是不会每份都能养出MSC的，不过我是听说~没自己养过~据说挺难养~

壹DD

1.试剂问题，2 O/ O  H3 C: L# q
2.方法技术问题。/ l- M) F1 H) R/ C) l, c
试问你的细胞敢用临床吗？& f' M# h1 O% ^- w4 l
+ X& P  N# ^! {; C$ h

Roden

脐血稀释---红细胞裂解液裂解稀释后的脐血---取上清液-----再用密度梯度离心----吸取白膜层（白膜层不是很明显）---PBS洗两便---
9 ]' z! C, m) G  T楼主详细解释下这两步吧？为什么不直接密度梯度离心？

camus

跟楼上有同样的疑问

nankou2008

做过脐带间充质 组织块贴壁慢慢就爬出来了/ j9 s2 X$ `" K
脐带血干细胞也贴壁吗？

meister

回复 542177563 的帖子
& C! Z6 z' F0 V( p2 r3 K8 e6 J. O5 ^! X& y
是ＭＳＣ，EPC都没有吗？

camus

脐血间充质干细胞难道不贴壁吗请问？

hybaoyu

困难重重

542177563

回复 Roden 的帖子
  \7 V/ A) Y$ B9 X: a
6 E" Z9 p% W7 E9 k+ E6 K+ _5 F, r这周二又做了一次，干脆把脐血稀释之后直接密度梯度离心，而且离心后也见到白膜层了，但今天还是没有见到贴壁细胞。