错在哪一步，望赐教！------谈脐血分离MSC

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具体步骤是：脐血稀释---红细胞裂解液裂解稀释后的脐血---取上清液-----再用密度梯度离心----吸取白膜层（白膜层不是很明显）---PBS洗两便---一部分养在DMEM中想得到MSC，另一部分养在EGM中为了得到EPC（用的是培养瓶，没有铺胶）------可三天后换液（换液时没有发现贴壁的细胞）------换液2天后发现瓶中仍没有贴壁的细胞。结果什么也没培养出来，步骤中哪一步错了，望赐教！

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回复 Roden 的帖子4 F9 M( l8 a6 M
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这周二又做了一次，干脆把脐血稀释之后直接密度梯度离心，而且离心后也见到白膜层了，但今天还是没有见到贴壁细胞。

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回复 camus 的帖子
/ E' T4 W4 {  I- v- _/ ^, k3 m: b; X
没发现有贴壁的，不知道为什么？

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回复 meister 的帖子
8 o+ y' x! ?: B, X
- g: M, Q+ G- n0 G. A5 d这周二又做了一次，干脆把脐血稀释之后直接密度梯度离心，而且离心后也见到白膜层了，但今天还是没有见到贴壁细胞

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回复 henryjia 的帖子
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养EPC是不是一定要铺层？我一般用的是培养瓶，听说瓶底一般有铺层，有时最多用多聚赖氨酸铺一下罢了！这对培养出EPC细胞的影响大吗？

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回复 henryjia 的帖子% l# o6 z2 @. G; G/ l) J

: M% K8 l6 Q8 D+ `你指的是取原代时不铺层吗？