我养的脐带间充质干细胞表型检测怎么CD105表达成阴性啊？

hwlightning

我养的脐带间充质干细胞表型检测怎么CD105表达成阴性啊？: z4 e$ X" z9 |
还有临床上用细胞刮刀收集细胞好不好？总感觉用胰酶不好？是外源蛋白。2 G* N! N0 j: U$ f5 x  g: @# Z: X/ F

mengnancy

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传代也是将细胞用胰酶消化下来后，用含FBS的培养基终止消化，收集细胞悬液，离心后将细胞沉淀用新鲜培养基重悬，接种。可以说是将细胞洗了一遍，也可以说没有洗。没有影响。

mengnancy

传代也是将细胞用胰酶消化下来后，用含FBS的培养基终止消化，收集细胞悬液，离心后将细胞沉淀用新鲜培养基重悬，接种。可以说是将细胞洗了一遍，也可以说没有洗。没有影响。

xuning1106

mengnancy 发表于 2012-5-31 12:13
* X8 n) J$ A% B: e0 {+ h; D回复 xuning1106 的帖子' c1 j* e. v" X  v; T2 Y
0 A4 n1 l; a# P1 n2 p1 m
传代培养，我们就洗一遍；流式检测，用pbs洗两遍；如果要临床应用，洗3-4遍。

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我们临床应用要洗3到4遍，传代都不洗诶，传代不知道洗与不洗有什么区别或者影响

mengnancy

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) J% T8 a1 }0 r# [2 n传代培养，我们就洗一遍；流式检测，用pbs洗两遍；如果要临床应用，洗3-4遍。

xuning1106

mengnancy 发表于 2012-5-29 10:47 * \: Z7 v0 k. x% j3 k6 R; \0 n
再做一次流式检测，第三代细胞CD105表达应该达到99%以上。含0.25%EDTA的胰酶消化后，洗3-4次细胞。胰蛋白酶 ...

9 t8 S) g* H' V* b消化后洗3-4次，如果要传代的话，对细胞损伤和量岂不是都有影响？

dwl1209

CD105是比较公认的MSC表型，按照现在大家的判断依据，在除去其他影响因素（如抗体质量问题）的情况下，一直不表达CD105，可以判断它不是UCMSC，因为UCMSC的表型里大多文献是认可有CD105的，不过不同来源的MSC表型仍有争议，表型鉴定也只不过是一个参考而已，你能从其他途径证明它就是UCMSC，那就是一个新的声音了呵呵。至于你说的不是HUMSC，你自己的样品是什么你不知道吗？种属差异可以影响MSC生长，但表型我就不清楚了，之前看过鼠和人的HSC表型是有差别。希望对你有所帮助，有认为不对的地方继续讨论

owenlion

应该可以检测出来的，你找下实验中的原因，抗体，检测过程中有没有问题，可能是些小问题。可以找几个对照做下，流式不是有标准检测颗粒的吗

hwlightning

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谢谢，我再试试下。

hwlightning

回复 dwl1209 的帖子  \( a8 z+ x5 Z& A7 u9 J
$ z/ y. C# L, s8 D7 M
如果CD105一直不表达，是不是可以证明这个细胞不是HUMSC？