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我养的脐带间充质干细胞表型检测怎么CD105表达成阴性啊?   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-5-28 21:43 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
我养的脐带间充质干细胞表型检测怎么CD105表达成阴性啊?1 S' [% |' m. b" j: A8 Z
还有临床上用细胞刮刀收集细胞好不好?总感觉用胰酶不好?是外源蛋白。
6 `8 d* W# O% W  y  C* I9 `/ _2 s
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沙发
发表于 2012-5-28 22:11 |只看该作者
你的细胞代次?还有纯度都可能影响你的结果的?7 Z, l  S5 E9 `' I% M5 H
细胞刮刀和胰酶没有比较过,只要细胞分散好,影响应该不是很大。
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藤椅
发表于 2012-5-29 08:50 |只看该作者
楼主的脐带来源MSC是收集的第几代细胞做的流式?使用细胞刮收集细胞,对细胞损伤较大,细胞容易结成团,MSC胰酶消化2-3min即可消化下来,细胞受损伤小,细胞溶液中以单个细胞悬浮与流式抗体结合,细胞表面分子更容易结合。
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板凳
发表于 2012-5-29 10:11 |只看该作者
回复 menghy 的帖子
9 t; s6 t3 h0 ]5 W* j# H8 q# E' s# m
; }* P) d( [( q7 X- e& i% ~8 m细胞是第三代细胞
& W3 N9 v) o& v( n3 a在临床上用胰酶消化细胞,回输前要不要做胰酶残量的检测,如果含有对人体不是很危害?
4 j2 t1 W# H/ l' Z其它细胞表型都正常,就是CD105为阴性
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报纸
发表于 2012-5-29 10:14 |只看该作者
回复 mengnancy 的帖子
+ t7 x' c5 }. N( ~2 K1 Z
% d0 m1 h6 o4 A+ q( @: O细胞是第三代
+ g' ~( _: p( k% [临床上能用胰酶吗?
: ]+ \+ S9 ~6 y& v我的就是其它表型都正常,就是CD105不正常,不知道是什么原因?
, m# u% i. V5 t% L还有细胞吹散后加入人血白蛋白可以防止结成团吧!

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地板
发表于 2012-5-29 10:16 |只看该作者
回复 mengnancy 的帖子
  T4 L1 y2 G+ @) \  p
/ S; C5 |* U' F# [- O/ [如果用胰酶,需不需要含ETDA?

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7楼
发表于 2012-5-29 10:47 |只看该作者
再做一次流式检测,第三代细胞CD105表达应该达到99%以上。含0.25%EDTA的胰酶消化后,洗3-4次细胞。胰蛋白酶残留,没有检测过。
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8楼
发表于 2012-5-29 10:47 |只看该作者
回复 hwlightning 的帖子/ g1 E4 C- p- f& [

. v0 o4 c7 F; x0 ?( [再做一次流式检测,第三代细胞CD105表达应该达到99%以上。含0.25%EDTA的胰酶消化后,洗3-4次细胞。胰蛋白酶残留,没有检测过。

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9楼
发表于 2012-5-29 11:28 |只看该作者
回复 mengnancy 的帖子
/ v6 J# B9 O$ ~' d1 X1 k& ^4 @  q
5 H+ H* M0 k+ D0 W0 y, L# {做了几次CD105还是没有表达,现在都不知道是什么原因。

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专家 优秀会员 金话筒

10楼
发表于 2012-5-30 09:05 |只看该作者
有阳性对照吗, 是抗体的问题吗?
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