请教高手：怎么才能做出好的ＥＢ呢？

wwy551

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0 f& O+ k# m. t5 U, n* a# ^/ O5 Q2 c: a* B( e4 s) A
我以前做过EB分化造血细胞，不过是hESC做的。因为当时做的EB状态都很不错，所以说说给你参考一下吧~~  [# Z/ i+ ~) g1 |" ?& M0 [! Y" K) D
dispase消化ES比正常传代消化的时间久一点，等ES克隆自己脱落之后，收集至离心管中，不离心，静置离心管让里面是克隆自然沉降，然后吸去上面没沉降下去的MEF feeder。DF12洗一次沉降的克隆，依然让克隆自然沉降，吸去上层的DF12。这样做可以保证得到的都是状态很好的克隆。最后用ES的培养液重悬接种至低贴附培养板。第二天开始用分化培养液分化。一般刚开始的两天，EB在显微镜下看起来发黑，随后就会慢慢变得圆溜溜，亮晶晶~~