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求助:培养CIK细胞时候怎么去除红细胞???高人解答,谢谢   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-3 12:10 |只看该作者 |正序浏览 |打印
我做CIK细胞培养,首先提取外周血单个核细胞,但这里面会混有红细胞,接种到培养瓶中培养,取悬浮细胞继续加生长因子培养,但是取悬浮细胞的时候还是有红细胞在里面悬浮啊,而且以后换液传代都是取悬浮细胞,那么红细胞不是一直都混在里面吗?用红细胞裂解液2次仍然去除不了红细胞,求高人解答,谢谢
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发表于 2012-8-27 09:15 |只看该作者
最方便的办法就是,用无菌注射用水裂解,把握好时间,一般时间控制在30秒就可以
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发表于 2012-8-24 09:51 |只看该作者
回复 113305060 的帖子. q6 N, N& e3 }! s

, _  P9 S$ t7 F1 P培养基的关系挺大的,一般1640培养基培养悬浮细胞,DMEM培养铁壁细胞,建议还是用1640培养,至于铁壁的细胞的出现是正常的,但是其和间充质干细胞是不一样的,其比较短,但是肥大,若加因子可以诱导为成熟的DC细胞。
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发表于 2012-8-23 11:00 |只看该作者
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回复 LL87 的帖子: L' K( ^9 C9 W% [" _6 z

! M3 x$ H- {6 P8 \流式专用的高渗的为什么不可以呢?掌握好时间就可以了么,然后洗去,我们都是这样的,要不然就用淋巴细胞分离液。
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发表于 2012-8-22 22:53 |只看该作者
回复 evial 的帖子
, K- n$ S1 c. y" Z( x2 {2 n* ?
不能用流式专用的,因为流式专用的是高渗的
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发表于 2012-8-17 13:45 |只看该作者
最便宜的方法,离心以后,去掉液体,加入无菌注射用水使红细胞裂解就可以了。
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发表于 2012-7-5 11:47 |只看该作者
关键看做什么用,如果是给病人回输的,混有一点点红细胞是无所谓的,不影响。没必要除掉。
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发表于 2012-7-5 09:01 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子5 O! }# x4 w: q, ~# y

6 j: a, f5 p  [好的,谢谢

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发表于 2012-7-4 23:35 |只看该作者
回复 113305060 的帖子' P# f+ {% L# h4 n- F  F
+ |6 E  L* D# A: ^9 O7 P
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
- {; C5 }7 l7 d+ L" {! a
# g2 _/ p3 |; s6 @$ Q1 N否则他会看不到
$ I! T: O4 m3 H. b$ N* D: e7 R% R- v" t1 ~5 g$ b4 E" m8 P" `* M) `# g" ?) Y
另外建议重新发个贴子提问 这样问 很少有人能看到

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发表于 2012-7-4 21:25 |只看该作者
一种是直接破红,在血液里加入裂解液,是用于检测,因为要加说明说体积的裂解液。另一种使用分离液提取,这样基本就已经去除红细胞了。不知你用的是哪种。
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