MEF细胞形态异样

nichifanlema2

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T75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：, @3 ~& N9 x* y% i
1.细胞复苏不好；( H! E$ P% v: S$ O
2.传代不均匀。
! ~4 A" P# S6 j, I+ {另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

回复 yaolinzhang 的帖子: H! j+ v+ ^3 \7 h
+ z! `: n& H' f; I0 z, Y  s
感谢前辈指点，多谢！

runsong

回复 nichifanlema2 的帖子4 M1 C& w8 b8 ?1 D

5 a. u  k* `5 f' d7 X  x% n别听他的。
7 ?) _' i+ J# _& Y其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

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9 k( `& h* p& `/ o9 B/ v  U! \1 a' ^) _
附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

回复 runsong 的帖子0 y. ^! m& m( m

# T# O4 `$ V& b6 i' R消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

回复 wawj 的帖子# R2 C  t8 R) o6 O3 Y: x
) z3 \; T1 N, p1 m6 D
如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

回复 scottist 的帖子" F3 i+ Z/ g! h% t2 N$ L
1 {2 J$ ?' R2 W. _
感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

回复 nichifanlema2 的帖子
3 k6 G9 B) m. S% C# A: I/ N: S* V! E! {7 V; t: |0 w
图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。