MEF细胞形态异样

nichifanlema2

$ H* h, C* p7 D4 E* T

9 _/ L8 Z6 P- {4 @2 e4 {T75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：. q; K2 }8 @7 T( L
1.细胞复苏不好；# x1 V; `  `- n% j/ E# Q
2.传代不均匀。
% G) A) ^! i9 ^% a( v另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

回复 yaolinzhang 的帖子0 Q! ^2 }& Q% [7 s" y

0 g& I' m+ r  B8 o3 s$ N* ]6 ~! @感谢前辈指点，多谢！

runsong

回复 nichifanlema2 的帖子  B6 F1 x1 |! ~8 ~8 o) F4 n
# P2 h  _# a9 a, {2 p
别听他的。, P, I( y. D) F' r7 Q7 _
其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

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4 N- Y8 R  j+ ^, H: |7 d% k
( `0 l3 u7 P9 j/ H附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

回复 runsong 的帖子- e$ d6 c# z1 m

; r. N, R) H# c# W消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

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如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

回复 scottist 的帖子6 y9 q$ E& m+ j5 I2 h9 K' t: }

: v6 [; O  t: g2 `3 Q感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

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图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。