MEF细胞形态异样

nichifanlema2

回复 wawj 的帖子* L7 S$ @8 W- I

2 {: T' l# |7 a; A& h$ f如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

回复 runsong 的帖子( }7 m& _6 y, k
# s) A; ?3 Z  I+ E
消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

wawj

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. x2 |2 N1 g" u# K8 f, k# c( p6 T+ K
/ w1 ^* d% @) m; n- \9 M% B) t1 B附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

runsong

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* p3 W8 y! E$ c0 t; ?4 S$ z
5 l+ g, m' A% N" ?别听他的。
# N3 W  s$ f; F) R其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

nichifanlema2

回复 yaolinzhang 的帖子1 x' V( w' q- [! |
* P$ h$ r5 b7 c4 w3 Y  O+ k( {
感谢前辈指点，多谢！

yaolinzhang

可能原因：
# ^, {! P! i% R1.细胞复苏不好；, `* c' S0 ^/ I6 u1 L2 R$ i: u
2.传代不均匀。
  ^" q" d' d0 G3 f另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题