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楼主: nichifanlema2
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[请教] MEF细胞形态异样   [复制链接]

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8楼
发表于 2012-7-7 10:20 |只看该作者
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回复 wawj 的帖子
! ~: \# e( `- s* ^" x  b$ v( Y% t# j1 ?6 C7 q
如图 111111111.jpg
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7楼
发表于 2012-7-7 10:18 |只看该作者
回复 runsong 的帖子
' S' S' p9 h' d# R0 p) c4 l2 K  a; C2 L
消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊?感谢指教啊~~

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地板
发表于 2012-7-6 23:04 |只看该作者
可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol,文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验,较大胚胎(>20)或成年小鼠的成纤维可呈梭形,而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。
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报纸
发表于 2012-7-6 21:12 |只看该作者
回复 nichifanlema2 的帖子
, X- _- ?6 Y1 j! l; g# S% \5 g1 R  ^, b
附图上来看看,你取得是几天的胚胎,一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞,但你都传到第二代了,应该比较纯了。再传一代试试,一般取3到5代的MEF做饲养层。
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板凳
发表于 2012-7-6 19:29 |只看该作者
回复 nichifanlema2 的帖子4 ]6 g! _: O+ t, Z9 t% Y
$ m  }1 l# `# K9 l) H
别听他的。
- ~) b/ b1 u' H+ G( s% K- [( M1 t8 s: r其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看,都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了,不要指望传代后状态会好转。
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藤椅
发表于 2012-7-6 16:19 |只看该作者
回复 yaolinzhang 的帖子
+ ~. Y. `  h6 @# l- I! H* Y$ |% j! Q2 ?2 y
感谢前辈指点,多谢!

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沙发
发表于 2012-7-6 15:53 |只看该作者
可能原因:# r1 a3 m. i) ^4 ~! r: R: s. J
1.细胞复苏不好;$ K" B  L+ C% q$ D3 u
2.传代不均匀。
( v, E: F8 ~* ^# e* c另外,起初形态不均匀是正常的,传几代就好的。我刚开始也是这样,后边还可以。多养几次就好了~!没大问题
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