荧光原位杂交（fish）探针设计原则和方法

xxp1246087085

谢谢大家，这两天忙考试了，没上网，非常感谢

l19rna

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$ Q0 r* o; H. B. W5 ~6 P; g: m
" m* U/ s1 B) K) ]7 ~, }1 `嗯嗯，非常感谢分享经验

flybear

做这种fish，先弄最好做的，比如actin等，做个阳性对照了！！！出来了，再做目的基因的！！！！

flybear

FISH要求的长度是1000-1200bp左右吧，如果做细胞的可能要考虑你的转化效率了！！！片段太短，特异性很差，这个楼主要考虑了！！！

l19rna

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7 }3 T  `1 [. v0 M6 r2 T/ R9 n, S8 U- @- \: K
木有影响，放心吧。你做体外转录时候还有载体上的一小部分序列呢，不会影响结果的

xxp1246087085

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8 F% `2 C6 h+ y: l9 N5 g+ o' a; s6 B0 W6 n2 a
我现在设计的500bp长度的探针，末端会有1-2bp的不匹配序列，不知道对结果有影响没有，我用的RNA探针

l19rna

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2 e( m$ M3 `3 e5 ]+ j) X
, \. d  g( u& a我现在只会做whole mount ISH of mouse embryo，不知道能不能帮到你了，呵呵

xxp1246087085

回复 l19rna 的帖子! @3 Q* Q' |# w3 i

' u  i/ w4 `4 [6 q以后还要多多请教啊

l19rna

回复 xxp1246087085 的帖子- R  d: ~2 i9 ]+ D5 C  w
$ e  N9 [3 o3 ]
兄弟加油，我已经搞定了

xxp1246087085

准备做RNA FISH，白手起家啊