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求胚胎脊髓神经干细胞提取方法 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-17 14:40 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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求胚胎脊髓神经干细胞提取方法

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藤椅
发表于 2012-7-18 14:31 |只看该作者
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沙发
发表于 2012-7-18 08:54 |只看该作者
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7 p& J  l' w: v9 L) J; i# p4 Y/ j4 W8 X. x$ i. A3 H
1:取脊髓,剔去外边的膜!& @+ m# J: \& ]; \+ o! ?
2:在解剖镜下去除白质组织!保留呈灰色组织!剪碎!! d2 p0 J& M. \. d& M/ B
3:37度下咦蛋白酶消化15min,血清液终止!. x8 @" T- R1 o: ?, ^2 a+ E
4:离心后用培养基吹打悬液!' v. {: U% N# l% Q
5:再离心一次,.调节密度!! c& k4 v# g' x4 v
6:放培养箱内2~3h。非神经元大部分贴壁., i/ E. r( Y% t" l! z. Y
7:然后将没有贴壁的细胞收集离心,计数- l( r; U$ x2 J" Q
8:将细胞培养于报被过得培养瓶上!4天后换液!9 L4 ^4 A+ v7 T5 M* i
清洗我一般用dmem报被就是多聚懒垵酸!养细胞为无血清的培养基
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