有养过RAW264.7的高手吗？

一转身的距离

如题，请教，为什么细胞冻存后复苏不贴壁？是不是RAW264.7对胰酶的作用很敏感？但是为什么在培养时又会觉得很难消化？
" b; Y: A" l3 g; m0 B才养这株细胞，急求解答！

一转身的距离

回复 myboluo 的帖子
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我们做了原代培养，2个小时后细胞就贴壁了，只是增殖就很慢了，贴壁后基本就不增殖了。这个问题我也一直很困惑~

一转身的距离

回复 crystal_xjw 的帖子/ Y9 E7 b. u3 }' X1 K% `

- t* g' c! }8 J/ c看样子这个细胞在消化时胰酶的用量和消化的时间还有吹打的力度都很有讲究。

一转身的距离

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# A. p5 B7 w1 o回复 myboluo 的帖子
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# F' L4 u, a  G: _. `, I3 D3 J不知道是不是冻存前培养时间太短的原因，因为冻存前细胞状态很好。最开始我们也是复苏培养的，2天后就可以传代了，1比3传代后，第二天就能冻存了。不知道是不是传代和冻存之间的间隔时间太短？冻存前消化时我们的消化时间确实比较长，超过了10min。

一转身的距离

回复 jimxia2011 的帖子
8 q5 P% ?4 L: w* ~
9 p6 R0 V$ s/ w3 {* n没有试过用预冷PBS浸泡，因为它贴壁牢，所以没想过可以用这种方法。可以试一下。

一转身的距离

谢谢各位的建议与宝贵经验，很受启发！非常感谢！

一转身的距离

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! r- _4 I: H$ ~. y3 @/ w  d回复 katysong 的帖子
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" c+ s; i2 i9 z我们原代培养的是腹腔来源的~