大家都是怎么消化mES的

不倒翁

最近养mES R1，看了很多protocol，都强调传代的时候一定要制备成单细胞悬液，要不然很容易分化。 我消化的时候0.05%的胰酶消化3min，一拍盘细胞全都掉下来了，然后加2倍体积的培养基终止，发现细胞吹不散，种下去还是成块的。有没有有经验的人指点一下，消化多长时间，加多少体积的培养基重悬，吹散的时候大概吹打多少下？先行谢过了~

不倒翁

回复 sciencesky1 的帖子7 [$ x8 O& h# T

2 o! v: Z$ K: {' c7 i' C% R) \' z我养在feeder上的

不倒翁

回复 sciencesky1 的帖子, n3 [# {) i& u

& y( a- J( v, O培养基是加lif的

不倒翁

回复 igdb 的帖子+ w% n, k; Q+ s! r
5 ~+ t4 [! Y) _1 \% N; S2 [8 T5 ^
就是在37°消化的 那我换胰酶试试

不倒翁

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1 X' a8 r- d- f( r$ L
0 g# x8 Q" i3 w8 ?. r# u5 i那我换胰酶试一下 你们用多大浓度的胰酶 消化几分钟

不倒翁

回复 BNJN 的帖子- m' r3 E4 R7 C3 J1 \8 N

( h' W* v! R4 v& ^6 Z嗯 谢谢提醒 我先换新的试一下

不倒翁

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6 X8 n6 {0 i! u" j. q+ p1 d) m* t# V" M
0.05还是0.5哦. A& `; l* p) j6 X9 W9 b

不倒翁

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6 v4 v/ P/ b+ s# z" X6 \- W/ G2 C6 Z
; b$ A! ^& c7 D( q' p嘿嘿 谢谢