大家都是怎么消化mES的

不倒翁

最近养mES R1，看了很多protocol，都强调传代的时候一定要制备成单细胞悬液，要不然很容易分化。 我消化的时候0.05%的胰酶消化3min，一拍盘细胞全都掉下来了，然后加2倍体积的培养基终止，发现细胞吹不散，种下去还是成块的。有没有有经验的人指点一下，消化多长时间，加多少体积的培养基重悬，吹散的时候大概吹打多少下？先行谢过了~

不倒翁

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; Z1 Z- R: g: K我养在feeder上的

不倒翁

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! K' t8 q2 k( W' a. i' W培养基是加lif的

不倒翁

回复 igdb 的帖子4 T" X8 w, c( y, q. e- {! }

3 e' d+ [# G/ ?( w3 F8 k5 q- z就是在37°消化的 那我换胰酶试试

不倒翁

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' A* Y+ e9 k% ?# X+ \1 R/ K" B7 Y那我换胰酶试一下 你们用多大浓度的胰酶 消化几分钟

不倒翁

回复 BNJN 的帖子% L3 L9 h! `/ W# M* p* u

+ y3 ?9 H5 d6 g' E" g/ u+ [( F嗯 谢谢提醒 我先换新的试一下

不倒翁

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不倒翁

回复 BNJN 的帖子6 f- `1 G- u* f" k' E" Z, D& f
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嘿嘿 谢谢