ficoll淋巴分离液分析骨髓间充质干细胞

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，有明显的三层分层，但看不到传说中的狭窄白膜层，然后我在红白相间的地方抽取了约2ml液体（计数板每个视野约50个细胞），加pbs800转离心5min，弃上清，再细胞计数却发现没有几个细胞了。问题：没出现白膜层是否跟离心参数有关，加PBS离心是否因为2ml中有淋巴液，结果细胞又悬浮在上清液中被弃掉了呢，希望各位不吝赐教。

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回复 katysong 的帖子
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谢谢，第一次发帖，图片前面的文字没有显示，操作过程：小型猪骨髓&DMEM稀释液和分离液按1:1，转速3000R15min就出现图片的结果了，但是就没有明显的白膜层，不知3000R15min是否需要改进

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回复 小猪快跑 的帖子8 S  v; j* g+ j4 Y8 E

, I( S1 X+ T$ l3 F+ Z谢谢，第一次发帖，图片前面的文字没有显示，操作过程：小型猪骨髓&DMEM稀释液和分离液按1:1，转速3000R15min就出现图片的结果了，但是就没有明显的白膜层，不知3000R15min是否需要改进，800转5min是想洗一遍细胞用的

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回复 wangzhiqi86 的帖子% |( f9 d* {1 @: _, b# N2 q
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谢谢，第一次发帖，图片前面的文字没有显示，操作过程：小型猪骨髓&DMEM稀释液和分离液按1:1，转速3000R15min就出现图片的结果了，但是就没有明显的白膜层，不知3000R15min是否需要改进，细胞计数的图片没有保留，你的意思是单核细胞应该很多吗，那MSC形态与其他单核细胞一般怎样辨认呢？

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回复 wangzhiqi86 的帖子* \: I! U7 C7 `% ^
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稀释液用加样枪每毫升加到ficoll液上的，但还是感觉会混到一块

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回复 lxm5668 的帖子* x  O+ W& h' G1 Z5 `+ {; y
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好的，谢谢，下周再试一次，希望能有好结果