ficoll淋巴分离液分析骨髓间充质干细胞

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，有明显的三层分层，但看不到传说中的狭窄白膜层，然后我在红白相间的地方抽取了约2ml液体（计数板每个视野约50个细胞），加pbs800转离心5min，弃上清，再细胞计数却发现没有几个细胞了。问题：没出现白膜层是否跟离心参数有关，加PBS离心是否因为2ml中有淋巴液，结果细胞又悬浮在上清液中被弃掉了呢，希望各位不吝赐教。

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回复 katysong 的帖子! I* s3 T5 ^8 l5 ?' _  x' d

7 A* P9 Q( [8 c! L& g3 N# C/ P9 [; J谢谢，第一次发帖，图片前面的文字没有显示，操作过程：小型猪骨髓&DMEM稀释液和分离液按1:1，转速3000R15min就出现图片的结果了，但是就没有明显的白膜层，不知3000R15min是否需要改进

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回复 小猪快跑 的帖子6 u& c% W" Q/ x5 G
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谢谢，第一次发帖，图片前面的文字没有显示，操作过程：小型猪骨髓&DMEM稀释液和分离液按1:1，转速3000R15min就出现图片的结果了，但是就没有明显的白膜层，不知3000R15min是否需要改进，800转5min是想洗一遍细胞用的

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回复 wangzhiqi86 的帖子* V" ~( h, J) c# Q

5 m7 n3 k* f, Y$ n. E  E谢谢，第一次发帖，图片前面的文字没有显示，操作过程：小型猪骨髓&DMEM稀释液和分离液按1:1，转速3000R15min就出现图片的结果了，但是就没有明显的白膜层，不知3000R15min是否需要改进，细胞计数的图片没有保留，你的意思是单核细胞应该很多吗，那MSC形态与其他单核细胞一般怎样辨认呢？

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回复 wangzhiqi86 的帖子
. ~7 T+ U# S: j. D5 u! Z  n$ Q; v+ p+ l2 J3 e% |" j- N7 v4 X
稀释液用加样枪每毫升加到ficoll液上的，但还是感觉会混到一块

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回复 lxm5668 的帖子
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5 E; ]# {4 h5 ]" H- {好的，谢谢，下周再试一次，希望能有好结果