怎么将出生后0-3天雌性小鼠的生殖细胞和颗粒细胞分开？

chenchunlei

贴壁？最好能有实验操作步骤

aulenuyah

你这是要分离卵母细胞吗？老鼠太小了呀

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子
  |& t3 \/ g$ ~6 \
$ w$ p7 j9 G* Q要颗粒细胞

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子
$ r1 Z, A; F, @( V9 R- m* f! Y
) f: ^6 ~* T2 Q$ C- O1 Y3 U什么样的颗粒细胞？就是腔前卵泡上面的颗粒细胞吗

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子/ ?) ^# k+ {) x( u1 m
) Z, `1 p/ m) X& B0 t
就是将0-3d卵巢消化后怎样获得颗粒细胞* p/ X5 ]5 f. B' L/ H8 z. Z

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子
  a/ s$ _* V" V" f& O7 l5 W7 x4 j
我以前取过成年小鼠的。建议你不要直接消化。先在显微镜下将卵巢用异物针撕碎，然后用0.1%胶原酶吹打消化，之后再显微镜下将腔前卵泡检出，然后单独消化腔前卵泡，这样得到的颗粒细胞会比较纯净。因为你要做的是幼鼠，尚无有腔卵泡的发育，只能取腔前卵泡，而且不管怎么样，细胞都不会很多，如果细胞需要量大的话，就只能多杀老鼠了。。。

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子
* X( h( [( w2 T' f" M! a4 l+ A
% P) V1 V, [$ e) Q3 q谢谢
3 i$ t& }' Q6 Z+ i之前用了四个卵巢一消化离心后几乎没有颗粒细胞了

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子/ X& t/ U5 ]  N7 g- X' H; ^

" j# M9 f" c" t如果这样的话，试试看不离心

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子. M* ~3 |/ v! i1 E
1 b1 m) ]& N; i: ]3 O
那岂不会有TE在培养液里1 W& [  m4 J1 t

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子
' ?  X$ g# G7 Y! U/ R& [* ~  b% y# B1 \- ?
怪不得你弄不出来呢，一般消化颗粒细胞需要用透明质酸酶消化的，如果没有透明质酸酶也可以用胶原酶（0.1%浓度）代替。胰酶的作用太强烈了，颗粒细胞很脆弱，而且还那么少，受不了胰酶的。