质粒260：280 1.64怎么提纯呢？

willing

方法简单一点。

寒山拾得

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0 ?$ J1 f  S' i# ]
苯酚，氯仿抽提一下。
! o# W# d: o) W或者用PCR产物回收的过程过一下柱子。& L3 p, b4 m) ]

huangxf1998

有专门的试剂盒，从CHAGEN买。
, B% C3 H" c; ]' `2 D如果想省钱，那会很麻烦，分子克隆书上专门介绍了提取质粒的方法，很复杂，简单说一下，我做过一次，成功，而且量比试剂盒大多了，就是费事：
* |) b% A* c5 ~: B* T( p2 W1.扩增就不说了，因为你没问。
! j1 T) t% K" O: H) ]& k2 C2.苯酚，氯仿抽提所有的DNA，% W+ S% C% r3 L
3.将有质粒的所有DNA混合物放入CsCl、EB的溶液中混匀，1 {0 R2 z) ]! Q5 \/ ^  r
4.高速离心机离心过夜（可能一般实验室都没有这么高速的离心机）+ L% |6 G& f! j; U1 x: A
5.取分层的（EB)层（粉红色的）。) {/ u+ o) Y( ]- `
6.然后就比较简单了，按照提DNA的方法提就可以。
7 l" }( j* l4 m* \$ E2 y
& F- w5 K+ c5 X5 w基本原理：; q- C% A1 K% G% {
1.高速离心的目的就是把不同分子量的DNA分层次离出来。
/ I0 l; x5 ^& E( M- E' i2.氯化铯使离心分层得以实现。' ]' d2 T. X4 x( J* g8 g
3.环状质粒分子量较小，停留在EB的区域，很容易鉴别。2 [$ Z  J* B. e8 P
" M7 W3 Q+ p5 x! M
比较复杂吧，兄弟，还是买试剂盒吧！有做大提的，有做小提的。我建议你买个小提的，虽然还是很贵，但是方便多了，过一下柱子而已。半天搞定！你老板会同意的。

willing

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7 o6 r2 h, w1 i: H. t/ |, r& H我有质粒小提的试剂盒，你说的就是这个试剂盒吗？