哪位大侠分过小鼠成体成纤维细胞？

echowdk

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最近想要做一批。提前谢过。

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1．取材
, i4 ]4 |1 y) b2 a1 w) F& t0 N取取剃毛后的耳缘组织，置于盛放PBS（加双倍双抗）15ml或者50ml的离心管中。: f3 Z7 k  v/ L+ E
2．材料处理        # ~4 S; N6 ?+ l# L; W
（1）耳缘组织带回实验室后用加有双倍双抗的PBS冲洗后的置于3.5cm培养皿中，用手术刀去除皮毛和骨。' S# L! k, q. D# W
（2）在盛有DPBS的平皿中，用镊子将耳缘组织上残余的毛拔掉，反复清洗，直至DPBS中无任何杂质为止。
* n( U1 e, d. D（3）将耳缘组织放入一小皿中，尽量将其剪碎，呈糊状，加入少量培养液。
% u' q2 b3 `+ r: g7 D7 W1 G3．细胞培养9 K/ f: P8 o& f
（1）收集组织块转移至15ml离心管中，离心1000rpm，3min。
2 {% e9 m% D0 o# T（2）弃去上清，以培养基重悬组织块，转移至T25培养瓶中，尽量将组织块均匀分布，同时小心吸去组织块周围的培养基。
# @+ ?& P6 k& ?6 U+ |（3）倒置培养瓶37℃过夜培养，次日翻转，加入1.5ml培养基。$ B0 F0 u: Z* P) S
（4）隔日换液，约4日可见组织块周围有细胞爬出
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