成软骨诱导阿利新蓝染色

huajie881026

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前些日子自己试着做了成软骨诱导分化，5天左右细胞成一团，随着时间慢慢变大，诱导至满28天，细胞团直径约达2mm，团块较白，感觉上是诱导成功了。昨天石蜡包埋，然后切片、脱蜡、脱水后，阿利新蓝染色30min后，拍了照片（如下图），一些疑惑请教做过成软骨诱导的大侠：
/ R" H' X1 @# u$ ?- G1、切片是不是厚了？昨天切的时候设置的是5um，但切下来的时候感觉厚了，有些地方有重叠；% f) _$ r1 f9 b# V
2、阿利新蓝染的是粘多糖，应该是在外周部分还是中间部分？; g- u5 ]+ c. ?  }$ N
100×
0 P3 I) |+ ~! }( t1 d
, d" e! T8 `) _( V200×
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屋檐上的乌鸦

学习了。

winstonsee

软骨求一般看不到长吧，或者变小，我诱导得到的软骨球都很小；石蜡切片不顺利的话可以试试冰冻切片

农夫山泉nn

回复 tutufei 的帖子4 g1 M; K: X; p0 x$ I! @

) W) r( m$ _; c9 ^你好，时间有点久了不知道你还能看到这则消息不了，我软骨诱导的细胞也好小，不知道你最后怎么包埋切片的？最终染上色没有呢？

644414915

回复 细胞海洋 的帖子# J; |5 Y- A) _8 Q; u/ ]6 M

4 t2 J/ }/ g; A, C: Y2 w8 J2 h谢谢哈，开始没找到

tutufei

回复 huajie881026 的帖子$ N# c/ t, U) j0 h% |& t2 N
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请问你用的阿利辛兰如何配的？pH?

ytumuyangren

回复 huajie881026 的帖子
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& B2 d2 O9 x) V. V1 t! T$ m9 S好的，谢谢你，我再试试，有问题再请教你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子: m, o) `! T: }# h+ Y( r
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一般pellet不会扶起来吧，形成球形后有软骨的乳白色的感觉，一般轻易不会散开，你再试试吧" u5 S$ g1 `$ }% k9 T7 K( k
PS：离心后三天不要去动它，三天后换液的时候基本感觉的到了

ytumuyangren

回复 huajie881026 的帖子
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我已经做了快一个月了，每次都是前一天刚做好的pellet，第二天pellet上部有球状物，再过两天，球状物就崩解了，在往后就看到离心管底部一直是片状物，pellet没有浮起来的迹象，我再试试吧，不过还是要谢谢你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子
9 X/ ?- i; k, l' o" c/ b$ L" O4 D2 W3 R3 ]: T: a
嗯 我也是这么做的  每次换液的时候要小心诱导基不要影响到pellet
0 g) `9 p+ L" L7 O1 w: A3 f你要不再试试