成软骨诱导阿利新蓝染色

huajie881026

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前些日子自己试着做了成软骨诱导分化，5天左右细胞成一团，随着时间慢慢变大，诱导至满28天，细胞团直径约达2mm，团块较白，感觉上是诱导成功了。昨天石蜡包埋，然后切片、脱蜡、脱水后，阿利新蓝染色30min后，拍了照片（如下图），一些疑惑请教做过成软骨诱导的大侠：* ^" E2 S; k! I1 u
1、切片是不是厚了？昨天切的时候设置的是5um，但切下来的时候感觉厚了，有些地方有重叠；
4 q) y7 K3 S; }. {  T# z& p2、阿利新蓝染的是粘多糖，应该是在外周部分还是中间部分？
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3 w- G4 T4 V4 ~7 i200×2 ]) b! I2 B+ i0 |/ M- @2 d

屋檐上的乌鸦

学习了。

winstonsee

软骨求一般看不到长吧，或者变小，我诱导得到的软骨球都很小；石蜡切片不顺利的话可以试试冰冻切片

农夫山泉nn

回复 tutufei 的帖子
8 f5 ]/ A& i9 _) b( k' @3 r: O
$ Y7 [, G9 u" I) g0 u5 @: |7 f你好，时间有点久了不知道你还能看到这则消息不了，我软骨诱导的细胞也好小，不知道你最后怎么包埋切片的？最终染上色没有呢？

644414915

回复 细胞海洋 的帖子2 k# k! s3 `% |* p; d! W

' i, _3 ^" }+ \+ [( \谢谢哈，开始没找到

tutufei

回复 huajie881026 的帖子) ~+ |" t0 c& c# m4 K4 T/ M0 D$ B7 u' [6 F# G
; J$ E5 v; L' E9 z
请问你用的阿利辛兰如何配的？pH?

ytumuyangren

回复 huajie881026 的帖子6 Z3 A1 m5 M9 C' M7 J5 {* l  N

' N! T6 Z5 W. M% [7 ~2 o好的，谢谢你，我再试试，有问题再请教你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子9 P+ o% |* y0 `

6 w0 D9 f3 S/ j7 ?5 J6 d* s9 M一般pellet不会扶起来吧，形成球形后有软骨的乳白色的感觉，一般轻易不会散开，你再试试吧
3 G* K/ r1 e& Q5 i! C: X+ kPS：离心后三天不要去动它，三天后换液的时候基本感觉的到了

ytumuyangren

回复 huajie881026 的帖子5 y9 I- h+ m& z, O- n

5 K% b1 d# J9 I$ K- h, |我已经做了快一个月了，每次都是前一天刚做好的pellet，第二天pellet上部有球状物，再过两天，球状物就崩解了，在往后就看到离心管底部一直是片状物，pellet没有浮起来的迹象，我再试试吧，不过还是要谢谢你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子
, Z3 y  w+ W) \; j& c3 k' {3 Z) d9 Y# H5 ^* v
嗯 我也是这么做的  每次换液的时候要小心诱导基不要影响到pellet7 O+ w; u' s7 V: g! P6 ^  `
你要不再试试