成软骨诱导阿利新蓝染色

huajie881026

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前些日子自己试着做了成软骨诱导分化，5天左右细胞成一团，随着时间慢慢变大，诱导至满28天，细胞团直径约达2mm，团块较白，感觉上是诱导成功了。昨天石蜡包埋，然后切片、脱蜡、脱水后，阿利新蓝染色30min后，拍了照片（如下图），一些疑惑请教做过成软骨诱导的大侠：
1 R& X: L3 o7 a( q1、切片是不是厚了？昨天切的时候设置的是5um，但切下来的时候感觉厚了，有些地方有重叠；
# E  w. p5 F6 n4 {8 t7 ^) q2、阿利新蓝染的是粘多糖，应该是在外周部分还是中间部分？
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200×
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屋檐上的乌鸦

学习了。

winstonsee

软骨求一般看不到长吧，或者变小，我诱导得到的软骨球都很小；石蜡切片不顺利的话可以试试冰冻切片

农夫山泉nn

回复 tutufei 的帖子
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# b, x% H" B1 K" ^% i  R你好，时间有点久了不知道你还能看到这则消息不了，我软骨诱导的细胞也好小，不知道你最后怎么包埋切片的？最终染上色没有呢？

644414915

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, `- {4 ^( {, M谢谢哈，开始没找到

tutufei

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请问你用的阿利辛兰如何配的？pH?

ytumuyangren

回复 huajie881026 的帖子9 ?; s* Q! H- S( Y* s
6 R" Y" _& T& l
好的，谢谢你，我再试试，有问题再请教你！

huajie881026

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& m" @+ W# L% ?- i3 C3 g- G
3 U! S' @7 q; Q% ^: J8 T5 s- ]/ y一般pellet不会扶起来吧，形成球形后有软骨的乳白色的感觉，一般轻易不会散开，你再试试吧( [- N: m  n3 f4 r4 f! F- x
PS：离心后三天不要去动它，三天后换液的时候基本感觉的到了

ytumuyangren

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" \5 k1 {- s7 g1 C7 x6 z* e
7 z, U; l" V; X. ?5 |" c8 I! N我已经做了快一个月了，每次都是前一天刚做好的pellet，第二天pellet上部有球状物，再过两天，球状物就崩解了，在往后就看到离心管底部一直是片状物，pellet没有浮起来的迹象，我再试试吧，不过还是要谢谢你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子& B0 ~2 L6 P; @
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嗯 我也是这么做的  每次换液的时候要小心诱导基不要影响到pellet
; Z* W' a$ V- `你要不再试试