成软骨诱导阿利新蓝染色

huajie881026

4 H; X+ h' J) K. t5 z5 u+ V

& U! X( B- B2 ]0 t4 X$ o前些日子自己试着做了成软骨诱导分化，5天左右细胞成一团，随着时间慢慢变大，诱导至满28天，细胞团直径约达2mm，团块较白，感觉上是诱导成功了。昨天石蜡包埋，然后切片、脱蜡、脱水后，阿利新蓝染色30min后，拍了照片（如下图），一些疑惑请教做过成软骨诱导的大侠：
% }$ N1 w- Y1 h4 n1 G1、切片是不是厚了？昨天切的时候设置的是5um，但切下来的时候感觉厚了，有些地方有重叠；% Y% |& o$ p  }$ B. I4 P0 r
2、阿利新蓝染的是粘多糖，应该是在外周部分还是中间部分？' Y9 N9 L1 q1 Z* X3 ?5 r
100×
' ^8 @4 S" d' U# W/ A
% k3 {' N7 L( a* k200×  D( H6 `; G6 i7 {& N: |1 \$ A: |8 w$ T

屋檐上的乌鸦

学习了。

winstonsee

软骨求一般看不到长吧，或者变小，我诱导得到的软骨球都很小；石蜡切片不顺利的话可以试试冰冻切片

农夫山泉nn

回复 tutufei 的帖子5 U/ l" E- J5 Q  f* |& y
$ k2 R9 J; X$ O$ }9 T
你好，时间有点久了不知道你还能看到这则消息不了，我软骨诱导的细胞也好小，不知道你最后怎么包埋切片的？最终染上色没有呢？

644414915

回复 细胞海洋 的帖子# {9 p3 Z5 r5 e$ Y" O5 T, }6 e
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谢谢哈，开始没找到

tutufei

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请问你用的阿利辛兰如何配的？pH?

ytumuyangren

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好的，谢谢你，我再试试，有问题再请教你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子1 a  \: u6 K( c, l  l% ^
5 @& t1 m7 _  b" ~
一般pellet不会扶起来吧，形成球形后有软骨的乳白色的感觉，一般轻易不会散开，你再试试吧
# k& X& C4 q- l" u# }& f) XPS：离心后三天不要去动它，三天后换液的时候基本感觉的到了

ytumuyangren

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5 L, c" E! u- F( X我已经做了快一个月了，每次都是前一天刚做好的pellet，第二天pellet上部有球状物，再过两天，球状物就崩解了，在往后就看到离心管底部一直是片状物，pellet没有浮起来的迹象，我再试试吧，不过还是要谢谢你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子
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6 J1 [9 j$ [" _5 K5 B& A( R嗯 我也是这么做的  每次换液的时候要小心诱导基不要影响到pellet6 n- B1 `2 ]: [( P6 f" I6 X, O( r) D
你要不再试试