成软骨诱导阿利新蓝染色

huajie881026

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前些日子自己试着做了成软骨诱导分化，5天左右细胞成一团，随着时间慢慢变大，诱导至满28天，细胞团直径约达2mm，团块较白，感觉上是诱导成功了。昨天石蜡包埋，然后切片、脱蜡、脱水后，阿利新蓝染色30min后，拍了照片（如下图），一些疑惑请教做过成软骨诱导的大侠：* _* S5 d! u1 ]
1、切片是不是厚了？昨天切的时候设置的是5um，但切下来的时候感觉厚了，有些地方有重叠；. E3 }* a7 h2 r2 z  a1 d* L8 j& \% \
2、阿利新蓝染的是粘多糖，应该是在外周部分还是中间部分？
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200×
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屋檐上的乌鸦

学习了。

winstonsee

软骨求一般看不到长吧，或者变小，我诱导得到的软骨球都很小；石蜡切片不顺利的话可以试试冰冻切片

农夫山泉nn

回复 tutufei 的帖子
6 Z* T* Z5 w9 W0 A# T
- U9 i4 ~7 _8 ?2 a你好，时间有点久了不知道你还能看到这则消息不了，我软骨诱导的细胞也好小，不知道你最后怎么包埋切片的？最终染上色没有呢？

644414915

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4 v$ u' o2 R7 d& y& U: L! O" g$ Z
谢谢哈，开始没找到

tutufei

回复 huajie881026 的帖子2 B% G& Q3 n# r$ m
% |4 d8 t) U8 ]) f# l6 F$ n
请问你用的阿利辛兰如何配的？pH?

ytumuyangren

回复 huajie881026 的帖子4 R( F; w2 W2 |: r5 h" k* Z

4 @: E& e" a% a( g3 s( [, @# E好的，谢谢你，我再试试，有问题再请教你！

huajie881026

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一般pellet不会扶起来吧，形成球形后有软骨的乳白色的感觉，一般轻易不会散开，你再试试吧
! v4 _% w. z' ]1 S$ BPS：离心后三天不要去动它，三天后换液的时候基本感觉的到了

ytumuyangren

回复 huajie881026 的帖子
/ G8 @% b0 O1 @1 o" \% h, O8 q4 o& G
我已经做了快一个月了，每次都是前一天刚做好的pellet，第二天pellet上部有球状物，再过两天，球状物就崩解了，在往后就看到离心管底部一直是片状物，pellet没有浮起来的迹象，我再试试吧，不过还是要谢谢你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子
* `* }6 ], x$ s5 Q7 y( ]0 ]. v3 ^( H9 D% S$ G
嗯 我也是这么做的  每次换液的时候要小心诱导基不要影响到pellet8 h: _4 M/ S5 M) i) A' D5 V
你要不再试试