成软骨诱导阿利新蓝染色

huajie881026

, l) O9 @8 M# t3 b; I' e! {; N7 n; w1 r( ^6 `! b2 }1 N, b9 ^
前些日子自己试着做了成软骨诱导分化，5天左右细胞成一团，随着时间慢慢变大，诱导至满28天，细胞团直径约达2mm，团块较白，感觉上是诱导成功了。昨天石蜡包埋，然后切片、脱蜡、脱水后，阿利新蓝染色30min后，拍了照片（如下图），一些疑惑请教做过成软骨诱导的大侠：
+ }3 j4 q* ^1 ^3 h) d1、切片是不是厚了？昨天切的时候设置的是5um，但切下来的时候感觉厚了，有些地方有重叠；
: E' b' `! G9 z# U0 `% t% O1 u2、阿利新蓝染的是粘多糖，应该是在外周部分还是中间部分？
+ v  F" [+ s4 O9 a4 h3 N100×
- ?) r$ A2 t. {' T: ^
8 ]% l0 }; _5 Q: x- X. f& _4 f200×
2 g1 G+ U3 R. e  J

屋檐上的乌鸦

学习了。

winstonsee

软骨求一般看不到长吧，或者变小，我诱导得到的软骨球都很小；石蜡切片不顺利的话可以试试冰冻切片

农夫山泉nn

回复 tutufei 的帖子
! Z" I' |5 R4 O# H! m& l# o: w# @! j. c/ M6 Y( x: b# z3 ^
你好，时间有点久了不知道你还能看到这则消息不了，我软骨诱导的细胞也好小，不知道你最后怎么包埋切片的？最终染上色没有呢？

644414915

回复 细胞海洋 的帖子3 f* s; P1 h6 r

: Z: q* _5 [2 K谢谢哈，开始没找到

tutufei

回复 huajie881026 的帖子! r7 c! t/ D. b/ x3 H" S, }

5 l3 i! t( u" a, d% h请问你用的阿利辛兰如何配的？pH?

ytumuyangren

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8 m- T/ w/ |. W% d/ ^! |7 C& B% ~' D8 s0 [5 Q
好的，谢谢你，我再试试，有问题再请教你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子8 L/ T6 n4 X( p% f# ]/ v
# a# N' f. S0 q' O3 l
一般pellet不会扶起来吧，形成球形后有软骨的乳白色的感觉，一般轻易不会散开，你再试试吧  D+ w' N+ r$ K3 w
PS：离心后三天不要去动它，三天后换液的时候基本感觉的到了

ytumuyangren

回复 huajie881026 的帖子( f0 ]2 r# V7 r1 J" w; M  F3 E
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我已经做了快一个月了，每次都是前一天刚做好的pellet，第二天pellet上部有球状物，再过两天，球状物就崩解了，在往后就看到离心管底部一直是片状物，pellet没有浮起来的迹象，我再试试吧，不过还是要谢谢你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子/ O2 P6 B- L3 l2 X6 y

, M/ J9 X2 |. S( y- f嗯 我也是这么做的  每次换液的时候要小心诱导基不要影响到pellet
* Y- u7 ~7 v& l& j! x你要不再试试