96孔板的种板与收获细胞数

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如题，不知大家种96孔板和收获时每孔种细胞数是多少？请把细胞数、细胞类型和依据都说一下。) t: Q8 S2 U8 s4 n6 T2 [, E
我做的是间充质干细胞，种板的密度10000和20000/孔都试过，但由于孔很小在显微镜下不好观察，也不知道它们长到80-90%大概是个什么样子以及大概有多少细胞（因为我要在细胞长至80-90%汇合度时检测相关指标）。

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总结下各种孔板细胞接种量 仅供参考
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* t9 D! E6 _' V1 p  J细胞培养瓶（板）生长面积容量与细胞数（大约）2 j' W/ F, d. v6 }
: m* e6 }6 \2 d" P
96孔板       4~5X10 4          35mm培养皿           1X10 6
0 f% m0 l# }0 u& _8 D. v1 c# h$ f9 D5 C& A  B9 [* g5 V9 a
48 孔板      1.3X10 5            60mm培养皿         2.6X10 60 u3 d8 a: D( _1 y. Y
24孔板       2.5X10 5           100mm培养皿           7X10 60 t4 a" j0 N' j* ~: U, [
12孔板        5X 10 5              150mm培养皿         1.8X10 7
4 Z! f- ^3 a& G& r  \3 l( t0 w" E: |3 k: u  6孔板        1.2X10 67 o5 X  n5 z0 _4 a
1 M7 B: @" p0 M/ k: ?8 ?6 H' Q
细胞瓶面积        容量          工作体积         细胞数目612.5cm2         25ml                 2ml            5X10 5
' p1 ]; d1 Q+ T; P25cm2            50ml                 5ml             1X10 684 {3 ?* M6 T$ j* R/ d2 `
1 T' G) p* R3 x5 N4 x
35cm2             75ml                10ml           2X10  6
1 s  U; K' ^+ u5 e4 b& B: A' [
75 cm2            250ml              15ml           4X 10  6
; q6 R) L3 ~  B' R, i* J* r$ h7 H
150cm2           700ml              40ml         1.1X107( y* I- M' T# K4 w* ?& s  W4 w
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补充：不同孔板所加培养液的液面都不宜太深，一般在2~3mm范围，结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量（参考下表）。若加液量过多会影响气体（氧气）交换，而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。
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2012-10-15 09:23 上传

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jihaijie

关键看你测定什么指标，一般接种5000-10000就行，然后根据生长特点，融合70%处理细胞，能满足测定要求。

flydayzhu

低氧环境会有什么影响？？

jihaijie

这个看文献，有的是缺氧，低氧和高氧。对细胞的刺激是不同的。

Donnies

首先要看你做的是什么实验，细胞生长速度如何，如果细胞生长很快，你需要两三天之后再做实验，铺板时候的细胞量就需要少一些，而且铺96孔板你需要严格计数，这样你可以控制一下实验的进度，如果细胞长的慢的话，可以多一些，如果你铺1万个细胞的话其实是很多的，我之前做MTT一般也就五六千个细胞，96孔板的底表面积是0.3cm2，而你一般传代用的是直径10cm的大皿，底表面积为60cm2，你可以根据这个计算一下

prophe

CCK-8实验，一般接种3000-5000个细胞，细胞为10T1/2细胞。