96孔板的种板与收获细胞数

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如题，不知大家种96孔板和收获时每孔种细胞数是多少？请把细胞数、细胞类型和依据都说一下。
3 ]0 ?- }1 s# |9 v+ j  U我做的是间充质干细胞，种板的密度10000和20000/孔都试过，但由于孔很小在显微镜下不好观察，也不知道它们长到80-90%大概是个什么样子以及大概有多少细胞（因为我要在细胞长至80-90%汇合度时检测相关指标）。

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" I9 O. e4 w# j/ f6 W8 `4 ^0 U  H. r3 A$ G+ w0 V
总结下各种孔板细胞接种量 仅供参考  U7 R* \* {% P; r* I# k
( ?. B, I2 J- o
细胞培养瓶（板）生长面积容量与细胞数（大约）6 `; Z1 K9 G3 \9 g3 B
0 C9 j, y" o) v! n8 h, y5 m( f* |
96孔板       4~5X10 4          35mm培养皿           1X10 6
4 w* N# D5 w  Y# ]& D: e  t' i( C1 n) _% z# N8 Y
48 孔板      1.3X10 5            60mm培养皿         2.6X10 69 o* \) Q: N$ H: F% T
24孔板       2.5X10 5           100mm培养皿           7X10 6
# N1 z/ C/ |8 i12孔板        5X 10 5              150mm培养皿         1.8X10 7$ ~3 n9 ^, E- D% H: Y4 D1 ~) j
  6孔板        1.2X10 6
/ G( q7 x* y. p, k+ M# ]! q1 ?7 e1 B, j
细胞瓶面积        容量          工作体积         细胞数目612.5cm2         25ml                 2ml            5X10 5
5 e7 s* ?/ L2 `7 z8 Q' N25cm2            50ml                 5ml             1X10 68
9 A2 K* j5 A) Z% z( W. e
/ P, j" l7 s! z6 Y+ ]0 [3 p) w35cm2             75ml                10ml           2X10  61 V+ X2 P) s7 F9 e0 d9 _5 i* l
9 n0 K: b$ `5 C8 \, E. |5 t7 k* _
75 cm2            250ml              15ml           4X 10  6
* N1 z3 P2 Z" h( |% I. L. |9 j& l( k: F4 s0 a
150cm2           700ml              40ml         1.1X107
2 j( u- B$ Z' U" H3 h; Z7 g. T& C0 z9 N% i
补充：不同孔板所加培养液的液面都不宜太深，一般在2~3mm范围，结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量（参考下表）。若加液量过多会影响气体（氧气）交换，而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。
4 n" m$ o  Z2 X- ]( d/ ~8 D' o" A7 i# p3 B+ P2 o/ N

% L) _  ~) |, Q, h# O( l9 T5 w( [* F

2012-10-15 09:23 上传

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jihaijie

关键看你测定什么指标，一般接种5000-10000就行，然后根据生长特点，融合70%处理细胞，能满足测定要求。

flydayzhu

低氧环境会有什么影响？？

jihaijie

这个看文献，有的是缺氧，低氧和高氧。对细胞的刺激是不同的。

Donnies

首先要看你做的是什么实验，细胞生长速度如何，如果细胞生长很快，你需要两三天之后再做实验，铺板时候的细胞量就需要少一些，而且铺96孔板你需要严格计数，这样你可以控制一下实验的进度，如果细胞长的慢的话，可以多一些，如果你铺1万个细胞的话其实是很多的，我之前做MTT一般也就五六千个细胞，96孔板的底表面积是0.3cm2，而你一般传代用的是直径10cm的大皿，底表面积为60cm2，你可以根据这个计算一下

prophe

CCK-8实验，一般接种3000-5000个细胞，细胞为10T1/2细胞。