怎么才能抑制间充质干细胞老化 - 间充质干细胞专区干细胞之家



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zhangxiudong

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楼主

发表于 2012-10-18 16:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我一直养间充质干细胞，但是有一个很突出的问题就是很容易老化，也总是有杂细胞，我认为最经典的鱼群状或呈漩涡生长的细胞才是最好的，但是只有原代是这样的，只要传代就会杂乱，我实在想不出什么原因或方法阻止它了

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沙发

发表于 2012-10-18 17:03 |只看该作者

鱼群状的描述我还是第一次看到，很生动！1 H7 `# S' ~4 }$ X6 M5 |2 l
为防止MSC老化，建议降低血清浓度，降低传代时的细胞生长密度。

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sanna1

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藤椅

发表于 2012-10-18 20:22 |只看该作者

我也有存在这个问题，恨头痛。血清是关键，但我倒觉得在传代时要增加细胞的密度。

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星火燎原

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板凳

发表于 2012-10-18 23:32 |只看该作者

1、从原代着手，要控制原代的接种密度和培养时间，最好能在2周之内传代，时间久了就算长的很好，也会出现一传就老的现象。" I) F6 q* T* H
血清最好用进口的，浓度可以相对高一点。传代时细胞不易长的太满，80%左右为宜，这还是要根据个人经验。临床上用于治疗的自体干细胞，由于病人长期接受常规治疗（抗生素类），导致干细胞数量减少，接种密度要大一些。) j# l3 L# m9 O5 o0 i' Q
原代有杂细胞是很正常的，有集落就行，传代之后会好很多，第一次传代密度要大一点，否则很容易老化。
2、老化跟胰酶消化也有很大关系，要协调好消化的方式、时间和浓度。尽可能减少对细胞的损伤。原代细胞比较杂，贴壁时间长，贴的比较牢，相对较难消化。有些不是干细胞的要舍弃，不要等全部消化下来，消化过程中注意观察。( O6 N2 C% K' S7 O' c1 @% p
3、另外培养体系（温度、co2浓度、空气流通、ph值、培养液等）也很重要，要进行定期检测。