怎么才能抑制间充质干细胞老化

zhangxiudong

我一直养间充质干细胞，但是有一个很突出的问题就是很容易老化，也总是有杂细胞，我认为最经典的鱼群状或呈漩涡生长的细胞才是最好的，但是只有原代是这样的，只要传代就会杂乱，我实在想不出什么原因或方法阻止它了

mrstemcell

鱼群状的描述我还是第一次看到，很生动！
4 i! q3 l3 Z* V+ i2 [: g* X$ D为防止MSC老化，建议降低血清浓度，降低传代时的细胞生长密度。

sanna1

我也有存在这个问题，恨头痛。 血清是关键，但我倒觉得在传代时要增加细胞的密度。

星火燎原

1、从原代着手，要控制原代的接种密度和培养时间，最好能在2周之内传代，时间久了就算长的很好，也会出现一传就老的现象。
/ P  _  k' T; r6 c# q: D- S血清最好用进口的，浓度可以相对高一点。传代时细胞不易长的太满，80%左右为宜，这还是要根据个人经验。临床上用于治疗的自体干细胞，由于病人长期接受常规治疗（抗生素类），导致干细胞数量减少，接种密度要大一些。
6 S0 A1 D/ ~$ h: L0 F% Y( W: y- r) D原代有杂细胞是很正常的，有集落就行，传代之后会好很多，第一次传代密度要大一点，否则很容易老化。! R; S3 a2 c+ `8 Q% h: V
2、老化跟胰酶消化也有很大关系，要协调好消化的方式、时间和浓度。尽可能减少对细胞的损伤。原代细胞比较杂，贴壁时间长，贴的比较牢，相对较难消化。有些不是干细胞的要舍弃，不要等全部消化下来，消化过程中注意观察。' o  H1 M  w1 \+ X4 g& x) O# W
3、另外培养体系（温度、co2浓度、空气流通、ph值、培养液等）也很重要，要进行定期检测。

zhangxiudong

谢谢

jj2570782

进口血清或者加因子

Tim

回复 jj2570782 的帖子
- `. ~2 k( ]( y. c  o, o  Z' U5 J6 [
" y: w  f$ I3 M) {! }) {方便讲一下您的培养基吗？
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zhangxiudong

就是A-MEM和10%进口血清

deshenglll

最好选低血清的培养基，接种时密度要适中，细胞要及时处理。

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我个人觉得MSC老化的原因有以下几点  x2 M/ z3 d( C! w: x% t7 O4 k
1摸索着降低血清的浓度，最好是低血清培养8 ^2 w! u( }' X% S/ s/ A. f% J
2传代的时候掌握消化的时间和方法，可以用比较温和的酶传代，或者将酶稀释下，这样可以减少对细胞的损伤，降低老化的可能
7 Y" h4 P. j: D: y- H3传代的时间上掌握好可以纯化MSC 降低老化的几率