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怎么才能抑制间充质干细胞老化 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-10-18 16:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我一直养间充质干细胞,但是有一个很突出的问题就是很容易老化,也总是有杂细胞,我认为最经典的鱼群状或呈漩涡生长的细胞才是最好的,但是只有原代是这样的,只要传代就会杂乱,我实在想不出什么原因或方法阻止它了
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沙发
发表于 2012-10-18 17:03 |只看该作者
鱼群状的描述我还是第一次看到,很生动!
4 i! q3 l3 Z* V+ i2 [: g* X$ D为防止MSC老化,建议降低血清浓度,降低传代时的细胞生长密度。
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藤椅
发表于 2012-10-18 20:22 |只看该作者
我也有存在这个问题,恨头痛。 血清是关键,但我倒觉得在传代时要增加细胞的密度。
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板凳
发表于 2012-10-18 23:32 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
1、从原代着手,要控制原代的接种密度和培养时间,最好能在2周之内传代,时间久了就算长的很好,也会出现一传就老的现象。
/ P  _  k' T; r6 c# q: D- S血清最好用进口的,浓度可以相对高一点。传代时细胞不易长的太满,80%左右为宜,这还是要根据个人经验。临床上用于治疗的自体干细胞,由于病人长期接受常规治疗(抗生素类),导致干细胞数量减少,接种密度要大一些。
6 S0 A1 D/ ~$ h: L0 F% Y( W: y- r) D原代有杂细胞是很正常的,有集落就行,传代之后会好很多,第一次传代密度要大一点,否则很容易老化。! R; S3 a2 c+ `8 Q% h: V
2、老化跟胰酶消化也有很大关系,要协调好消化的方式、时间和浓度。尽可能减少对细胞的损伤。原代细胞比较杂,贴壁时间长,贴的比较牢,相对较难消化。有些不是干细胞的要舍弃,不要等全部消化下来,消化过程中注意观察。' o  H1 M  w1 \+ X4 g& x) O# W
3、另外培养体系(温度、co2浓度、空气流通、ph值、培养液等)也很重要,要进行定期检测。
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报纸
发表于 2012-10-19 09:25 |只看该作者
谢谢

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地板
发表于 2012-10-19 11:07 |只看该作者
进口血清或者加因子
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发表于 2012-10-20 22:10 |只看该作者
回复 jj2570782 的帖子
- `. ~2 k( ]( y. c  o, o  Z' U5 J6 [
" y: w  f$ I3 M) {! }) {方便讲一下您的培养基吗?
, i- w+ t2 ~- R# R9 T* P. H

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发表于 2012-10-22 09:12 |只看该作者
就是A-MEM和10%进口血清
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金话筒 优秀会员

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发表于 2012-10-26 15:52 |只看该作者
最好选低血清的培养基,接种时密度要适中,细胞要及时处理。
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发表于 2012-11-2 11:06 |只看该作者
我个人觉得MSC老化的原因有以下几点  x2 M/ z3 d( C! w: x% t7 O4 k
1摸索着降低血清的浓度,最好是低血清培养8 ^2 w! u( }' X% S/ s/ A. f% J
2传代的时候掌握消化的时间和方法,可以用比较温和的酶传代,或者将酶稀释下,这样可以减少对细胞的损伤,降低老化的可能
7 Y" h4 P. j: D: y- H3传代的时间上掌握好可以纯化MSC 降低老化的几率
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