神经干细胞固定问题！在线等答案！

Tim

我今天上午做了个神经干细胞固定！固定完后细胞像被胰酶消化一样！感觉很差！不能用来鉴定了！大家帮忙看看我的问题出在哪里？（1） 吸取培养液。) P) }, P$ Z8 g
        （2）用PBS洗了一次！时间1MIN4 {! T  L7 q5 M& l
          (3)  加4%的多聚甲醛0.5ML，超净里放置20min，吸掉多聚甲醛
& T* C& W& s+ O/ j         （4）用PBS洗3次！每次1min，% N/ T& E& l4 J9 Q8 T
/ [, O$ W: O: T- C1 z
多聚甲醛不是我自己配的。我这里有俩种多聚甲醛（1）4%多聚甲醛   0.01M      (2)4%多聚甲醛   0.1M   
2 Y% t+ A0 {" M9 |( s) A8 C我上午用的是(1)多聚甲醛          这俩甲醛有什么不同吗？？0.01M    0.1M指的是啥？？
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: `( H& {. p( }. _# n# z0 v/ ]   

Tim

回复 zb_ming 的帖子
1 V; K0 D! U' i7 N0 w1 J
. M. `$ r9 t1 O5 |之前一直是在负20放着！37度水浴锅融化！！多聚甲醛没见任何异常！细胞固定前状态还可以！本人认为可能是时间20min有点长？？？老师你认为呢？& ~$ m; P6 `5 A. K$ t  e

Tim

回复 ljs 的帖子8 A+ E5 r) L& |& ^4 f3 H3 i

2 S! A) k: O  R& S% z; G回答（1）固定完后境下可见细胞回缩！像酶消化过后！. P. Y+ F6 }: r0 Z; c
       （2）固定完后细胞回缩很厉害！成片的向上飘！贴壁的没多少了！( P9 D, \# C& S" d# r
       （3）实验条件就有多聚甲醛，还有共聚焦。还不是我配的！4度固定这个真不知道。至于时间我们老师说20MIN就好，具体我也看了看文献！
1 Y6 t+ Q8 c) f4 y         
6 @! P5 Q, i- k+ Y0 _/ j4 m4 Q, s: p$ y
福尔马林固定方法能具体讲讲吗?还有在4度固定的原理？

Tim

回复 guoye0210 的帖子
, n4 l( j6 e+ J: l1 A
' P8 d+ i# L$ O& H: Z  L现在实验室只有以前配的！但是我同事前几个月还固定过没啥变化！

Tim

回复 zb_ming 的帖子# d$ J! ~& h0 G8 {

( g* O5 K$ n$ \* k7 i我现在想想应该是多聚甲醛的PH值有问题！

Tim

回复 bibottll 的帖子6 @* o5 Y9 Y# ^8 q# D- ?+ Q

* R* ]- {$ h5 G$ @, [) Z对细胞的影响咋样！回缩了吗！？、