神经干细胞固定问题！在线等答案！

Tim

我今天上午做了个神经干细胞固定！固定完后细胞像被胰酶消化一样！感觉很差！不能用来鉴定了！大家帮忙看看我的问题出在哪里？（1） 吸取培养液。
; M# x5 y7 q( B! w8 q: |        （2）用PBS洗了一次！时间1MIN6 [8 K* {( \. n+ ^9 Y
          (3)  加4%的多聚甲醛0.5ML，超净里放置20min，吸掉多聚甲醛
7 a6 m% i7 o& z, q- \         （4）用PBS洗3次！每次1min，
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3 i$ {) n) `1 _, H多聚甲醛不是我自己配的。我这里有俩种多聚甲醛（1）4%多聚甲醛   0.01M      (2)4%多聚甲醛   0.1M   
! u3 w2 V0 J6 C* G% T( P我上午用的是(1)多聚甲醛          这俩甲醛有什么不同吗？？0.01M    0.1M指的是啥？？1 G6 n! i9 h, @3 P& P3 ?
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Tim

回复 zb_ming 的帖子! z4 A$ o' v: ?+ N& g5 M

3 ~  ?2 C% H$ Z( h" ^之前一直是在负20放着！37度水浴锅融化！！多聚甲醛没见任何异常！细胞固定前状态还可以！本人认为可能是时间20min有点长？？？老师你认为呢？7 k2 H! _- M4 B9 @5 K' r

Tim

回复 ljs 的帖子
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$ m0 D  q# E) @8 p4 G" U; I3 U回答（1）固定完后境下可见细胞回缩！像酶消化过后！$ d' h& g1 M4 ?  p7 Q
       （2）固定完后细胞回缩很厉害！成片的向上飘！贴壁的没多少了！
' @: q* e( _8 F# i       （3）实验条件就有多聚甲醛，还有共聚焦。还不是我配的！4度固定这个真不知道。至于时间我们老师说20MIN就好，具体我也看了看文献！
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福尔马林固定方法能具体讲讲吗?还有在4度固定的原理？

Tim

回复 guoye0210 的帖子- X$ H6 O, Q6 m
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现在实验室只有以前配的！但是我同事前几个月还固定过没啥变化！

Tim

回复 zb_ming 的帖子. r. V: j* j9 d
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我现在想想应该是多聚甲醛的PH值有问题！

Tim

回复 bibottll 的帖子, z6 Q  L. }$ m3 i
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对细胞的影响咋样！回缩了吗！？、