神经干细胞固定问题！在线等答案！

Tim

我今天上午做了个神经干细胞固定！固定完后细胞像被胰酶消化一样！感觉很差！不能用来鉴定了！大家帮忙看看我的问题出在哪里？（1） 吸取培养液。$ {9 {9 P- Q$ P4 A
        （2）用PBS洗了一次！时间1MIN
! d$ Q! k6 W# W2 x  O+ U' B          (3)  加4%的多聚甲醛0.5ML，超净里放置20min，吸掉多聚甲醛
: o( R* q2 P  K0 C" f0 M' F         （4）用PBS洗3次！每次1min，7 k. |4 c5 C& {5 w+ V

! r8 x. k( g! r6 k5 r多聚甲醛不是我自己配的。我这里有俩种多聚甲醛（1）4%多聚甲醛   0.01M      (2)4%多聚甲醛   0.1M   
' A* k8 F0 v& X# F" \$ E我上午用的是(1)多聚甲醛          这俩甲醛有什么不同吗？？0.01M    0.1M指的是啥？？
4 N# {  H  _2 p7 i6 A' ~# _" R6 p' o$ d: z
   

Tim

回复 zb_ming 的帖子
# I; r/ b! ?" a' y  w4 F* M
0 G+ g7 Y& Y9 v之前一直是在负20放着！37度水浴锅融化！！多聚甲醛没见任何异常！细胞固定前状态还可以！本人认为可能是时间20min有点长？？？老师你认为呢？0 H/ m' {) B0 }  y: q8 f

Tim

回复 ljs 的帖子4 v% A$ e! s) C. `/ F) T
6 `# f/ d4 Z0 P2 r, V
回答（1）固定完后境下可见细胞回缩！像酶消化过后！
/ a( o, S/ Q- t# p4 @! Q3 ^       （2）固定完后细胞回缩很厉害！成片的向上飘！贴壁的没多少了！; O6 o0 l) X6 l+ ~. o: ^
       （3）实验条件就有多聚甲醛，还有共聚焦。还不是我配的！4度固定这个真不知道。至于时间我们老师说20MIN就好，具体我也看了看文献！) j. w3 _6 b+ M
          9 _3 M! y/ W# t; y9 q& l9 b

3 q+ M, r' d* z福尔马林固定方法能具体讲讲吗?还有在4度固定的原理？

Tim

回复 guoye0210 的帖子) x6 g0 @( H+ M. \1 N
9 M- b# b& o9 |+ I, \6 v0 [
现在实验室只有以前配的！但是我同事前几个月还固定过没啥变化！

Tim

回复 zb_ming 的帖子$ d( Q  a* q3 M# b% c1 E/ c7 t' f
) M- n; b  V6 u" P/ A
我现在想想应该是多聚甲醛的PH值有问题！

Tim

回复 bibottll 的帖子
0 g) R3 ~" ]/ y1 K! H& q5 o* l' u0 h. |3 T. y: y
对细胞的影响咋样！回缩了吗！？、