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TetO-慢病毒表达系统的包装质粒是什么?   [复制链接]

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发表于 2012-11-11 17:19 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 细胞海洋 于 2012-11-11 17:35 编辑
$ E+ e- _3 g. G+ l% z8 i6 r4 ~
5 U  w/ V% D$ u% l请问有做TetO-慢病毒诱导iPSCs的吗?
# }# l$ i2 \; E6 X) \% ~
" v3 P8 ?) X& J; AProtocol中:For each 10-cm plate, use 10 μg of FUW-tetO-cDNA (Oct4, Sox2, Klf4 or c-Myc) lentivirus backbone with 2.5ug of pMD-G and 7.5 μg of pPax2.
5 o9 w5 m7 y3 Y* s7 X: E问题1:里面的包装质粒:pPax2是“Plasmid 35002: Pax2”还是“Plasmid 12260: psPAX2“?两者有什么区别啊?附图:
& k, ^2 H4 h2 l  K! Z% L1 R" _3 p以下图片点击可以放大/ f0 F( Z: I' w2 _+ c6 I, [$ C& l

& B0 m0 |7 R8 f, e5 x; \8 z问题2:而另外一种包装质粒pMD-G指的是”Plasmid 12259: pMD2.G“吗?附图:) ]) x+ I( J( Z' m
/ S6 D* j  I9 l1 Z3 {  B% T3 {3 X
pMD-G与pMD2.G有什么区别吗?
/ @8 u- ]: d. V* s4 Q, r
0 N* U2 |# y) `: A8 \. K" \+ x问题3:这两种质粒都可以用于慢病毒的包装吗?有没有什么影响啊?& R& H5 |2 d$ _' K9 P6 j

! Y$ ]' o/ j. h" ?# o问题4:还有一个质粒:Plasmid 20342: FUW-M2rtTA,这个对于四环素诱导也是必需的吗?也要一起包装吗?附图:
- `- H: ?) k) j4 p# w
* d( N9 _" Z5 W* T4 }
, T" D+ K# O" z7 r/ a" }3 V请知道的朋友帮解释一下。非常感谢!
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沙发
发表于 2013-3-1 09:45 |只看该作者
请问后来楼主用的是什么质粒,还有病毒都是购自哪个厂家?是有包装好的吗?我刚接触ips,希望指教,非常感谢。
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藤椅
发表于 2013-12-6 17:57 |只看该作者
小弟现在做p53对转化细胞代谢的影响,急求TET四环素诱导的wt-p53质粒,对接下来的实验非常重要,跪求论坛里的园友谁有这个质粒,可否赠小弟一点,不胜感激!
0 n  a% E, x4 k, ?- _5 T1 a& m# s人的或者大鼠的野生型p53都可以。
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