请教克隆的挑取

your1024

请教一下，大家在挑克隆的时候用的是什么来观察要挑取哪些克隆的呢？普通的体式镜么？为什么我用桂光的那种老式体式镜根本就看不到皿里的细胞呢？它那个底部光源是透视过去的，根本就看不清细胞轮廓。大家有什么好的挑克隆的器材和方法能介绍一下么？谢谢！

eley

一般使用套环法和无限稀释法
: }) P5 q) f$ ~套环法比较简单，可以去网上自己查一下。

yaolinzhang

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; d9 d; p6 q) l/ r* B/ ]' d- f; \: z5 Q8 y. |
我是在相差显微镜下挑的

your1024

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# [" [" C7 |5 e/ X$ ?& E1 G3 ^$ y  i& A) `( R0 e8 w
那是在什么镜子下进行的呢？

your1024

回复 yaolinzhang 的帖子, B) r; l9 V  l; J/ l5 R
4 i) U2 D: w; E8 U% l
是那种小型的可以放进安全柜的相差，还是那种大型的，放在室内的？

eley

回复 your1024 的帖子5 r* a+ i  d# }7 O. ]" R, }+ u. M8 q

; A" j4 A6 {* K* }相差显微镜就可以，我们实验室平常是放在细胞房的，可是要挑单克隆的话，我一般放到安全柜里面照一会紫外，然后在安全柜里面使用，这样有点麻烦，可是避免污染。4 v% H5 a6 u# f/ r  }, d

) M/ r2 n" r: Y最近做了一次，觉得阳性率挺高的，所以就直接用无限稀释单克隆方法了，希望对你有帮助。

aulenuyah

我一个同门一般都是用体式显微镜的，调整一下光就可以了

your1024

回复 eley 的帖子7 y- T; Y- g) d0 E. G' {

* P  q3 j, a7 L, q) Y7 d& T) [谢谢你的回答，我们实验室那个相差根本就搬不到安全柜里面去，看来还得想别的辙。能请教一下无限稀释是怎样的方法么？我不是从构建开始做的，有些方法了解的不是很清楚。

your1024

回复 aulenuyah 的帖子4 q  X9 c* e' Z* {8 \
5 @+ W/ D3 C% q; W% I0 S0 r% |8 i/ U
请问是调哪个光源呢？我那个镜子底部光是透视的，完全看不到细胞轮廓，加了柔光板也没有作用。能详细说明一下么？谢谢！

yaolinzhang

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1 l$ M7 ]7 s: s: ~
! Z$ d9 b! w% S5 E% g3 i) C  s3 C' e" A小型的，在生物安全柜里面