油红O染色后用水洗还是异丙醇洗?

UC-MSC

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MSC脂肪分化后，用油红O染色，但是染色之后该怎么洗涤呢？用水洗还是用异丙醇洗？

13122422967

用PBS，妥妥的~

UC-MSC

回复 沁蓝之城 的帖子& Z  ?( N+ [; R) Z' o2 q
$ t0 f- q. a" G7 k& J& |  H! G
细胞初始状态很重要；换分化培养基时融合度达到70-80%就可以了，不用等到100%

沁蓝之城

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7 j9 k2 A, Q; |6 z9 ?我买的也是gibco的，但是效果不是很好啊5 N% W6 D, R8 C# @6 t& Q: I9 s" W

UC-MSC

回复 xuzhijuan1989 的帖子5 ?( X: h# T2 O4 ?2 ~1 p
/ u8 N, X* x- C
买gibco的

xuzhijuan1989

回复 UC-MSC 的帖子* i1 ~5 g2 L: R2 ?$ `* j2 t

1 [4 X9 f2 d1 @6 o( I& F你好，我想请问下你脂肪诱导分化的配方是怎么样的？谢谢！

q838903017

直接用PBS洗就可以，油红o的储存液是融在异丙醇中的，工作液用蒸馏水稀释

如来的观音

1.Cell fixation with 4%PFA at RT for 30min.
: U0 W) s/ K. i- t( H2. Remove PFA and wash cell with PBS once.
$ ]1 ?& m! C( y5 t3. Then wash cell with 60% isopropanol for 30 min on a shaker.! L  u# l6 Q- N) D. f- ^+ H+ B' U
4. Remove 60% isopropanol and add working oil red O solution stain for 30 min on a shaker.% }% n4 G7 T6 x) Y0 b; u7 E' n
5. After 30min remove oil red O stain immediately and wash with PBS for 4 times.8 i; C* N2 f9 C  m+ p* y
6. Leave some PBS in the well and take picture.. V( N* s" E) ^$ \
The working oil red solution should be made fresh from the stock each time.
' l5 _. y" ^- T" t  `

kyo000

建议用PBS洗，油红O易溶于苯，溶于乙醇和丙酮等。

hynew

应用水洗。用异丙醇可将染料洗下来，可定量检测。
2 x. {. |1 I. c9 m$ x参考：https://www.mcdb.ucla.edu/Research/Lyons/Protocols_files/ADIPOCYTE_STAINING_W_OILREDO.pdf