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油红O染色后用水洗还是异丙醇洗? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-12-13 13:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 UC-MSC 于 2012-12-13 13:24 编辑   u. h. S$ I) g% i1 o

/ S6 r+ ~/ T/ k7 P' l& kMSC脂肪分化后,用油红O染色,但是染色之后该怎么洗涤呢?用水洗还是用异丙醇洗?
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沙发
发表于 2012-12-13 13:32 |只看该作者
应用水洗。用异丙醇可将染料洗下来,可定量检测。
4 s, b8 C& w  k+ {+ C  k参考:https://www.mcdb.ucla.edu/Research/Lyons/Protocols_files/ADIPOCYTE_STAINING_W_OILREDO.pdf
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藤椅
发表于 2012-12-13 16:09 |只看该作者
建议用PBS洗,油红O易溶于苯,溶于乙醇和丙酮等。
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板凳
发表于 2012-12-16 14:45 |只看该作者
1.Cell fixation with 4%PFA at RT for 30min.8 @! l! D& S2 a$ h5 S9 ?$ u
2. Remove PFA and wash cell with PBS once.- O' W0 I$ }$ [1 H3 H; i
3. Then wash cell with 60% isopropanol for 30 min on a shaker.( h: k+ @2 |$ h
4. Remove 60% isopropanol and add working oil red O solution stain for 30 min on a shaker.! Z0 S9 u# o# }" H. D
5. After 30min remove oil red O stain immediately and wash with PBS for 4 times.
# U# Z/ \& E* Y: e6 k6. Leave some PBS in the well and take picture.) j  z- ^, Q" c5 p% }0 A- a
The working oil red solution should be made fresh from the stock each time.; h7 d8 i1 V: g3 {6 _2 m$ i) s
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报纸
发表于 2012-12-22 11:59 |只看该作者
直接用PBS洗就可以,油红o的储存液是融在异丙醇中的,工作液用蒸馏水稀释
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地板
发表于 2013-1-6 19:35 |只看该作者
回复 UC-MSC 的帖子# y3 z& ]( k( t: }' t
: X2 J: Y$ d" U3 q: W
你好,我想请问下你脂肪诱导分化的配方是怎么样的?谢谢!

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发表于 2013-1-17 13:39 |只看该作者
回复 xuzhijuan1989 的帖子
7 K7 F, B3 A0 W/ S1 Y( W# }3 V+ }2 Z/ I
买gibco的
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发表于 2013-7-17 17:10 |只看该作者
回复 UC-MSC 的帖子
7 Q( S) n- f7 t7 X! o/ k2 W% n% `* o2 P6 l# i: w3 J
我买的也是gibco的,但是效果不是很好啊
4 p. v- J7 I% X

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发表于 2013-7-22 09:15 |只看该作者
回复 沁蓝之城 的帖子
  C% F- N9 j* `4 X8 Y
: c) U! ^# Q) E0 d7 l! t& {1 _3 r细胞初始状态很重要;换分化培养基时融合度达到70-80%就可以了,不用等到100%
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发表于 2013-7-22 17:30 |只看该作者
用PBS,妥妥的~
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