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油红O染色后用水洗还是异丙醇洗? [复制链接]

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发表于 2012-12-13 13:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 UC-MSC 于 2012-12-13 13:24 编辑 3 J3 F) ?, [0 G% @- F* E7 I* ^9 x
% f. F& I3 E) t& m
MSC脂肪分化后,用油红O染色,但是染色之后该怎么洗涤呢?用水洗还是用异丙醇洗?
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沙发
发表于 2012-12-13 13:32 |只看该作者
应用水洗。用异丙醇可将染料洗下来,可定量检测。0 k- {$ n7 G  L/ u1 [6 W# z
参考:https://www.mcdb.ucla.edu/Research/Lyons/Protocols_files/ADIPOCYTE_STAINING_W_OILREDO.pdf
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藤椅
发表于 2012-12-13 16:09 |只看该作者
建议用PBS洗,油红O易溶于苯,溶于乙醇和丙酮等。
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板凳
发表于 2012-12-16 14:45 |只看该作者
1.Cell fixation with 4%PFA at RT for 30min.
4 e7 Q6 b: R/ y3 x# G, ?1 R6 Z+ j2. Remove PFA and wash cell with PBS once.
2 T7 ^8 h% g4 F  Z6 H3. Then wash cell with 60% isopropanol for 30 min on a shaker.
" A. U- z- Q4 }% X4. Remove 60% isopropanol and add working oil red O solution stain for 30 min on a shaker.
2 ]0 \  k: k% j: d2 a5. After 30min remove oil red O stain immediately and wash with PBS for 4 times.
+ r8 h/ X$ R/ o6. Leave some PBS in the well and take picture.- i# u: m3 e' Z' s) F
The working oil red solution should be made fresh from the stock each time.( r6 R, n2 ]. r: ?5 P0 n  ]% s
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报纸
发表于 2012-12-22 11:59 |只看该作者
直接用PBS洗就可以,油红o的储存液是融在异丙醇中的,工作液用蒸馏水稀释
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地板
发表于 2013-1-6 19:35 |只看该作者
回复 UC-MSC 的帖子) i' d& f6 g, w& ^- t2 r

  c* t0 `* D, K( g/ e/ t0 Q你好,我想请问下你脂肪诱导分化的配方是怎么样的?谢谢!

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发表于 2013-1-17 13:39 |只看该作者
回复 xuzhijuan1989 的帖子
/ i/ U5 Z* m; d: I
, G2 J7 ?" Y9 @+ i) A, j# [买gibco的
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发表于 2013-7-17 17:10 |只看该作者
回复 UC-MSC 的帖子$ H6 p& C) `1 ?. ~8 o% C& Q4 N

/ o! J# q: z% j) H我买的也是gibco的,但是效果不是很好啊
: C# n% L8 J) |+ C  z

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发表于 2013-7-22 09:15 |只看该作者
回复 沁蓝之城 的帖子
9 F, {% M9 l0 y' x
5 o. m& P2 J  ]! J% d% C. R' C& l细胞初始状态很重要;换分化培养基时融合度达到70-80%就可以了,不用等到100%
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发表于 2013-7-22 17:30 |只看该作者
用PBS,妥妥的~
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