油红O染色后用水洗还是异丙醇洗?

UC-MSC

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MSC脂肪分化后，用油红O染色，但是染色之后该怎么洗涤呢？用水洗还是用异丙醇洗？

hynew

应用水洗。用异丙醇可将染料洗下来，可定量检测。
# k& D9 {* G1 x! m) h参考：https://www.mcdb.ucla.edu/Research/Lyons/Protocols_files/ADIPOCYTE_STAINING_W_OILREDO.pdf

kyo000

建议用PBS洗，油红O易溶于苯，溶于乙醇和丙酮等。

如来的观音

1.Cell fixation with 4%PFA at RT for 30min.7 G: o5 k* C7 n1 P5 I' p) m
2. Remove PFA and wash cell with PBS once.0 u: \2 ^: B: S/ i/ Z" s3 o
3. Then wash cell with 60% isopropanol for 30 min on a shaker.
2 \# T6 c6 a) J  u4. Remove 60% isopropanol and add working oil red O solution stain for 30 min on a shaker.
7 s8 `6 ^, h. |6 Z/ u/ B5. After 30min remove oil red O stain immediately and wash with PBS for 4 times.
7 O$ l! [; A3 K; k( F2 i3 j1 m6. Leave some PBS in the well and take picture.
. B; u$ H# ^, Z$ BThe working oil red solution should be made fresh from the stock each time.
: w+ o8 a$ b$ a8 Z) b; x  f

q838903017

直接用PBS洗就可以，油红o的储存液是融在异丙醇中的，工作液用蒸馏水稀释

xuzhijuan1989

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# {' @# N& f& \9 w6 P6 D7 _1 p1 N: E你好，我想请问下你脂肪诱导分化的配方是怎么样的？谢谢！

UC-MSC

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6 E* q, S# }+ F* u% z( \- R+ X. ^
& r5 ]9 A; x, R& c4 l买gibco的

沁蓝之城

回复 UC-MSC 的帖子9 |) v7 A' [" F3 a& C

( @9 S5 r9 j: k2 }, K5 Z/ ]( i& K  y我买的也是gibco的，但是效果不是很好啊
. o8 U6 \5 U0 o, b; B; u$ F% x

UC-MSC

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3 G2 T0 i* S3 l+ l& S7 v
细胞初始状态很重要；换分化培养基时融合度达到70-80%就可以了，不用等到100%

13122422967

用PBS，妥妥的~