油红O染色后用水洗还是异丙醇洗?

UC-MSC

2 w* u, g# w- l6 S; U

* N3 q  Q  ?2 p0 a0 HMSC脂肪分化后，用油红O染色，但是染色之后该怎么洗涤呢？用水洗还是用异丙醇洗？

hynew

应用水洗。用异丙醇可将染料洗下来，可定量检测。$ u1 Q* i8 V) c- _. H2 {
参考：https://www.mcdb.ucla.edu/Research/Lyons/Protocols_files/ADIPOCYTE_STAINING_W_OILREDO.pdf

kyo000

建议用PBS洗，油红O易溶于苯，溶于乙醇和丙酮等。

如来的观音

1.Cell fixation with 4%PFA at RT for 30min.0 r* |6 i" ~" b1 G' [
2. Remove PFA and wash cell with PBS once.
3 v. b$ l; l' G8 X1 ^3. Then wash cell with 60% isopropanol for 30 min on a shaker.9 f: \( _* Z: N
4. Remove 60% isopropanol and add working oil red O solution stain for 30 min on a shaker.1 m8 N6 r+ I4 G/ u, w
5. After 30min remove oil red O stain immediately and wash with PBS for 4 times.
: Q- m1 ]" r4 k: {4 N( \6. Leave some PBS in the well and take picture., H1 |) o& E; o
The working oil red solution should be made fresh from the stock each time.
0 a7 @: ]- y) O( B

q838903017

直接用PBS洗就可以，油红o的储存液是融在异丙醇中的，工作液用蒸馏水稀释

xuzhijuan1989

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5 P  {: Q- g! d4 l2 d6 ]) V6 F5 s* `+ d3 D4 P  p- m( C
你好，我想请问下你脂肪诱导分化的配方是怎么样的？谢谢！

UC-MSC

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7 N; F- E9 I; f: k) ]7 e; i5 o  t7 U1 |2 T
买gibco的

沁蓝之城

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! U. n: q. c" [( h- I; o) j
我买的也是gibco的，但是效果不是很好啊  B, l7 y2 W7 H* q" ^! v

UC-MSC

回复 沁蓝之城 的帖子2 i# ^+ l  Q7 \& v; S
9 ]( I8 E' B" {- y5 `
细胞初始状态很重要；换分化培养基时融合度达到70-80%就可以了，不用等到100%

13122422967

用PBS，妥妥的~