分离胚胎神经干细胞时候，D-hanks的作用？

碧落

大家是怎样分离胎鼠神经干细胞的呢？
/ L' l* m$ i/ }* q3 S. A# ]比如取E12.5的大脑皮层干细胞，那时候大脑还未发育完整，两个大脑半球还很脆弱，经常在撕脑膜的时候，把皮层都撕碎了。通常我们是将大脑浸泡在HBSS中的。
+ Z2 c. B- w+ e: I9 }但是某次见别的实验室的一个师兄分离E18.5的海马神经元的时候，用的是D-hanks，依稀记得当时他的解释是，D-hanks可以让组织变硬，易于分离。具体机制已经忘记了，再此和大家讨论一下。
' ^: r: q( z9 j. @* O$ F- l6 FHBSS和D-hanks的区别？D-hanks真的好用么？3 v' ^# @6 i7 \; k
希望互相学习，分享经验，欢迎参与讨论哦！

lousia04306

HBSS的全称是Hank's balanced salt solution ，他和D-hank's液都是平衡缓冲液，只是所含组分稍有不同。D-Hanks成分：（g/L）
5 r3 c5 c! i1 f: E( ]% {7 C KCl:0.4  p0 q$ }# K) m3 w, I0 U  A$ H" o1 ~
KH2PO4:0.062 _8 O; Y9 A) k1 l' ~$ Z/ P$ M* y
NaCl:8.0
0 g2 u' O9 V$ c" ], {. J# R NaHCO3:0.35
) W! }) c) Q- I$ C  y8 Z Na2HPO4.7H2O:0.06(Na2HPO4不含水：0.053)0 F0 B: h0 E7 W8 C6 h5 T
酚红：0.02
& J8 m9 [  q3 S, q% G2 B# U
$ F* q7 r5 B) C% d( h6 {Hanks液的配制：（1L） NaCl 8克、KCl 0.4克、MgSO47H2O 0.1克、MgCl•6H2O 0.1克、CaCl2(无水)0.14克溶、 葡萄糖1.0毫克、NaHPO4 0.154克、KH2PO4 0.06克、0.4%酚红液 5毫升
7 A- }" q! B. m: E 有的不加酚红。
; [  ]/ y& D5 T! V. ], b- C  C胰蛋白酶在pH8。0，37度时消化能力最强。溶液中的Ca、Mg离子和血清会降低其活力,一般配制胰蛋白酶溶液时。需用无Ca、Mg离子的D-Hanks液。所以说和是否易于分离没有多大关系。
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