分离胚胎神经干细胞时候，D-hanks的作用？

碧落

大家是怎样分离胎鼠神经干细胞的呢？
, H1 @2 O6 k7 ^; ?8 E- ?2 E比如取E12.5的大脑皮层干细胞，那时候大脑还未发育完整，两个大脑半球还很脆弱，经常在撕脑膜的时候，把皮层都撕碎了。通常我们是将大脑浸泡在HBSS中的。
- V" U3 F$ `& `& o. h但是某次见别的实验室的一个师兄分离E18.5的海马神经元的时候，用的是D-hanks，依稀记得当时他的解释是，D-hanks可以让组织变硬，易于分离。具体机制已经忘记了，再此和大家讨论一下。9 p7 i# M3 B; P/ @9 V0 U
HBSS和D-hanks的区别？D-hanks真的好用么？
8 `& ?2 ?9 C7 t9 b! \3 [) C) l希望互相学习，分享经验，欢迎参与讨论哦！

lousia04306

HBSS的全称是Hank's balanced salt solution ，他和D-hank's液都是平衡缓冲液，只是所含组分稍有不同。D-Hanks成分：（g/L）
3 M4 b& i. d( J* D KCl:0.4
& _& _7 Y/ d/ U* u KH2PO4:0.06% L  v/ Q+ [/ `8 R8 O( E
NaCl:8.0
. ^2 c# u* [6 ?' \8 Y5 F+ C6 x; j NaHCO3:0.35, ?; O$ S2 y$ A: Z
Na2HPO4.7H2O:0.06(Na2HPO4不含水：0.053)' m0 F- q- _+ w# `  r
酚红：0.02
! V& d9 W0 V6 W& J- K. M
5 O# B. g6 Y/ \. }Hanks液的配制：（1L） NaCl 8克、KCl 0.4克、MgSO47H2O 0.1克、MgCl•6H2O 0.1克、CaCl2(无水)0.14克溶、 葡萄糖1.0毫克、NaHPO4 0.154克、KH2PO4 0.06克、0.4%酚红液 5毫升) [# E: ?0 n7 R
有的不加酚红。2 X; g( b  N) T
胰蛋白酶在pH8。0，37度时消化能力最强。溶液中的Ca、Mg离子和血清会降低其活力,一般配制胰蛋白酶溶液时。需用无Ca、Mg离子的D-Hanks液。所以说和是否易于分离没有多大关系。
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