分离胚胎神经干细胞时候，D-hanks的作用？

碧落

大家是怎样分离胎鼠神经干细胞的呢？
3 J( B( `8 v" Z: e- t比如取E12.5的大脑皮层干细胞，那时候大脑还未发育完整，两个大脑半球还很脆弱，经常在撕脑膜的时候，把皮层都撕碎了。通常我们是将大脑浸泡在HBSS中的。/ G' H( O" i- p/ E0 Q6 Z8 u) |
但是某次见别的实验室的一个师兄分离E18.5的海马神经元的时候，用的是D-hanks，依稀记得当时他的解释是，D-hanks可以让组织变硬，易于分离。具体机制已经忘记了，再此和大家讨论一下。- b0 b! b/ i( G/ k4 k! w9 Y
HBSS和D-hanks的区别？D-hanks真的好用么？
0 z0 I; C9 R4 x* O9 ]3 [0 z希望互相学习，分享经验，欢迎参与讨论哦！

lousia04306

HBSS的全称是Hank's balanced salt solution ，他和D-hank's液都是平衡缓冲液，只是所含组分稍有不同。D-Hanks成分：（g/L）
: _/ `( I' h  N+ j4 E1 D, T KCl:0.4
9 z. C6 r& g1 d. e2 X; ] KH2PO4:0.066 [1 v- P: S, n8 O+ @
NaCl:8.0
/ f& x( }6 w4 c" C NaHCO3:0.35& q: f) T" x0 c! e
Na2HPO4.7H2O:0.06(Na2HPO4不含水：0.053)
( K1 F' n  M/ M3 }) Q& I+ B 酚红：0.02- d" _) Q. x' U. u, ?
6 Y* u) T5 l( z7 M+ K+ \% v
Hanks液的配制：（1L） NaCl 8克、KCl 0.4克、MgSO47H2O 0.1克、MgCl•6H2O 0.1克、CaCl2(无水)0.14克溶、 葡萄糖1.0毫克、NaHPO4 0.154克、KH2PO4 0.06克、0.4%酚红液 5毫升
4 ^' M  F$ C6 K: ^% T3 F1 Y! ] 有的不加酚红。
8 x3 o, a$ p9 y/ ~5 o' m$ C胰蛋白酶在pH8。0，37度时消化能力最强。溶液中的Ca、Mg离子和血清会降低其活力,一般配制胰蛋白酶溶液时。需用无Ca、Mg离子的D-Hanks液。所以说和是否易于分离没有多大关系。
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