分离胚胎神经干细胞时候，D-hanks的作用？

碧落

大家是怎样分离胎鼠神经干细胞的呢？- a+ |( L  h4 e0 B: J/ M$ m7 L$ ~+ ^
比如取E12.5的大脑皮层干细胞，那时候大脑还未发育完整，两个大脑半球还很脆弱，经常在撕脑膜的时候，把皮层都撕碎了。通常我们是将大脑浸泡在HBSS中的。, n& [5 g% b7 F0 @- H* C
但是某次见别的实验室的一个师兄分离E18.5的海马神经元的时候，用的是D-hanks，依稀记得当时他的解释是，D-hanks可以让组织变硬，易于分离。具体机制已经忘记了，再此和大家讨论一下。$ w* n5 E  D- c9 f& _2 q
HBSS和D-hanks的区别？D-hanks真的好用么？+ l* u  S( C+ A) m/ j/ a  F; s6 D
希望互相学习，分享经验，欢迎参与讨论哦！

lousia04306

HBSS的全称是Hank's balanced salt solution ，他和D-hank's液都是平衡缓冲液，只是所含组分稍有不同。D-Hanks成分：（g/L）
  f* k! w) v  u2 s: S KCl:0.4; ^5 W' y7 w0 h1 r' g2 G! m) i
KH2PO4:0.061 d; l; f" r( r$ M
NaCl:8.09 O7 {4 V$ l/ ]. d# v
NaHCO3:0.35
0 R$ B; E; l$ v3 l Na2HPO4.7H2O:0.06(Na2HPO4不含水：0.053)0 o8 N: f( x6 d. b
酚红：0.02
5 H2 y+ \  o9 f# b, U & g, s: H7 |- g0 h+ [1 A! _
Hanks液的配制：（1L） NaCl 8克、KCl 0.4克、MgSO47H2O 0.1克、MgCl•6H2O 0.1克、CaCl2(无水)0.14克溶、 葡萄糖1.0毫克、NaHPO4 0.154克、KH2PO4 0.06克、0.4%酚红液 5毫升
- y: S0 v- n5 T" M9 P6 X) R$ Z$ \ 有的不加酚红。
* X9 m) I$ D9 a4 d  L% G胰蛋白酶在pH8。0，37度时消化能力最强。溶液中的Ca、Mg离子和血清会降低其活力,一般配制胰蛋白酶溶液时。需用无Ca、Mg离子的D-Hanks液。所以说和是否易于分离没有多大关系。
% b4 C* X, s) G2 o1 E3 c