分离胚胎神经干细胞时候，D-hanks的作用？

碧落

大家是怎样分离胎鼠神经干细胞的呢？' @( R; y' F$ x% c; N
比如取E12.5的大脑皮层干细胞，那时候大脑还未发育完整，两个大脑半球还很脆弱，经常在撕脑膜的时候，把皮层都撕碎了。通常我们是将大脑浸泡在HBSS中的。
+ f, }" n+ ?4 W& ?. V/ w但是某次见别的实验室的一个师兄分离E18.5的海马神经元的时候，用的是D-hanks，依稀记得当时他的解释是，D-hanks可以让组织变硬，易于分离。具体机制已经忘记了，再此和大家讨论一下。) l- V; g( j, r% b! J: g+ H- V% P9 M
HBSS和D-hanks的区别？D-hanks真的好用么？7 v' t9 K- w/ h7 e9 d% v
希望互相学习，分享经验，欢迎参与讨论哦！

lousia04306

HBSS的全称是Hank's balanced salt solution ，他和D-hank's液都是平衡缓冲液，只是所含组分稍有不同。D-Hanks成分：（g/L）
; ~3 z" n9 P& ?+ K3 P KCl:0.4
3 D! h, ~, i$ @2 Z$ I. k5 C5 P- b KH2PO4:0.06
$ d/ r+ j* d9 t6 b NaCl:8.0: Y; J/ H7 T# Q0 r( l
NaHCO3:0.355 o2 W9 L3 G* I2 T& z% U
Na2HPO4.7H2O:0.06(Na2HPO4不含水：0.053)8 b: `3 y- b. l- n' I$ d& A
酚红：0.02
8 K& ]; w* ?8 S2 l+ O
, h# Y/ |" I& p9 RHanks液的配制：（1L） NaCl 8克、KCl 0.4克、MgSO47H2O 0.1克、MgCl•6H2O 0.1克、CaCl2(无水)0.14克溶、 葡萄糖1.0毫克、NaHPO4 0.154克、KH2PO4 0.06克、0.4%酚红液 5毫升
8 c2 D  |( J# E$ j2 c& J 有的不加酚红。$ n" o" w7 p5 D: C. ~. G/ b
胰蛋白酶在pH8。0，37度时消化能力最强。溶液中的Ca、Mg离子和血清会降低其活力,一般配制胰蛋白酶溶液时。需用无Ca、Mg离子的D-Hanks液。所以说和是否易于分离没有多大关系。
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