请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。- |& {) O( ?2 h
诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。
2 V9 P; L: H8 ]" m8 s培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。* ^. G3 r" n# F$ T: G' L7 c
可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。7 j& y( V, n* C6 j
第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
1 t# [( s6 u9 U之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。3 D+ t7 p: b0 \# ~
重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。
2 q* ^) {$ Z- ]- f) E% ^' W3 p恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

chimo100

我做跟你的方案差不多，第二天加CD3和IL-1a，脐血和外周血都可以做出来。脐血的CD3+CD56+要比外周血要高，而且脐血的CD56+单阳性的也比外周血多

zhenhuale

回复 bloodroses 的帖子' F, C' o& N8 X: d* f) ~
  N) [0 v! z- @8 h
请问楼主用的是国产的那个厂家的培养基啊？比国外进口的好？

yangpan521

培养基 用X-VIVO15和GT-T551效果应该会好于1640吧？

weijunning

回复 gejianyun 的帖子; ]9 R4 m' w" S  _' j+ y

! ~. W4 Q9 Y8 h之后只用含有IL-2的培养基进行扩增培养，其他因子不用加了。

luyue6453

回复 kiss2346 的帖子' J& |0 I+ ?# r

1 H0 r  D7 l& t" p4 |请教您，脐血CIK输注需要配血清吗？有相关文献吗？

lyj-0017

回复 孙帅帅 的帖子2 u$ X! ~, o  p! p: r

' n% ]9 H8 X6 o: t能否将你做流式的FSC/SSC图、圈门以及CD3/CD56双参数图发上来看一下呢？想向您学习一下，多谢了~

孙帅帅

我们   最好时候才28%左右~~   你们是怎么培养的啊？

yizuiqiannianga

脐血和外周血的性质不一样，不能用同一种方法来培养，下次你可以试一下脐血用干扰素伽玛，白二，白一，以及CD3.而外周血在培养过程中不要用白一

sunny.yc

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( J" d! i4 G8 e. G6 J0 `2 Q" B
( S, D( [: e3 y; @' U0 g如果你细胞培养量不大的话，可以添加50ng/ml的CD3单抗，不过成本就会高很多了