请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
3 u% b+ y* Y! f$ l& D诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。' W+ E  U* X& W* H6 r
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。
- G% D- B3 q+ o; Z$ B6 G5 V可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。
5 C$ F/ y' `5 y$ T+ K7 y+ z% I第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
: ^" P0 x! o% x  Z/ O) D之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。6 t3 O$ [- l8 n3 h; @
重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。0 V" W9 }$ t8 T8 m3 E4 V# X
恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

回复 bloodroses 的帖子) W0 k; @9 _6 z/ q

: Y/ }8 I, c. p- S) W: N: ?脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

回复 liutianhua 的帖子9 Q3 r  X. L- T7 ?+ B8 m, y

5 G4 ^0 I7 u4 A/ M# h谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

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1 E! |: P, b( X. ~: {+ J, C8 l' w/ [
( O+ E1 o9 _6 G. R请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

回复 bloodroses 的帖子2 Q, d( l7 X! k6 ?: {: P: l6 h8 x

9 A3 C4 A0 M. a$ i' A* g9 n和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

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# L3 }, s. p3 i% C. E/ A/ R: c. V5 e- v& {5 m
外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

回复 莫邪小仙 的帖子' S+ w! |9 e/ U; r( ~3 s

  ^, j/ t4 g+ v, _# Q, `3 x我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
& @& Q" u9 U% {* N+ H6 F! f. j小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。/ A( P' J5 C: X7 \
诱导 ...

% _' h: E! A+ S' {# k6 _  f/ E) `双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

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) r6 V5 h, c3 @! L/ G2 h; o; w$ h( u7 W+ ]  r/ S# m% f  u; N6 I. {
目前的数据只是个例! Q% j  N' m) u. m" l  N' k
数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说