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楼主: bloodroses
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请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3,CD56双阳性的问题   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

11楼
发表于 2013-1-21 12:44 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 bloodroses 的帖子, }# Q' @' c0 L) J/ k

. f; `; u9 }, j1 X( s0 c* ?你在养外周血的时候,也加入FBS了吗?应该是自体血浆吧; ^  {3 r/ i" E1 {# I) X

; s9 b$ e: f! Y$ ~% `0 Q1 I你试一下10%FBS和10%自体血浆只加一种
% ~7 o6 R. Y- e5 l( y3 N
( {' Y2 A, X1 @, ~因为自体血浆超过10%是对细胞有毒性作用的
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12楼
发表于 2013-1-21 16:18 |只看该作者
回复 sunny.yc 的帖子
* U$ I2 A9 f6 x$ r* K  r3 M: X% y' Q+ r' R  N$ ^. _
养外周血的时候,是用的国产无血清培养基,没有加血浆或者血清。
4 Z7 J3 l: Y9 m3 w养脐血的时候,不加血清,只加10%FBS,或者只加10%自体血浆,都做了单因素考察。可是还是没有双阳的细胞。
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13楼
发表于 2013-1-21 16:23 |只看该作者
做了一段时间CIK个人我这面的培养体系和你的差不多  IL-2是500的   而且我做的都是癌症病人的血,少部分脐带血,个人感觉脐带血增值效果会比病人外周血好太多了,你的外周血是正常人的吧?个人感觉外周血体系用在脐血上问题不大
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14楼
发表于 2013-1-21 16:36 |只看该作者
回复 kiss2346 的帖子
, X! l! |( d( Y; A9 W' ?  n" |; Y* o1 ?. C  ~9 m
外周血是正常人的血,没有炎症也没有癌症。
+ \7 E2 V8 ]1 z* X1 a5 m0 z# J请问你用的脐血,采血量是多少啊,血袋是多大容量的,抗凝剂是的成分和量是多少啊?
% i% A# b2 h; X3 s7 R9 A谢谢。
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15楼
发表于 2013-1-21 17:02 |只看该作者
回复 bloodroses 的帖子
  _1 C5 e" N! J
+ y4 h8 X: W8 N4 |一般脐血采血量在100左右,分离单个核大概在1.5*10~8左右 ,血袋容量是200的,抗凝剂是肝素钠
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16楼
发表于 2013-1-22 08:53 |只看该作者
我想请教下,培养2-3天后换液的时候除了添加IL-2,还要不要添加了IL-1和CD3?
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17楼
发表于 2013-1-22 09:14 |只看该作者
bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
" ~* H. ]$ }( Y0 f' r小弟刚刚接触CIK,养外周血CIK时,增殖团的数量和体积都相应增加,第7天双阳率是10%,第14天到了50%。
& o" Y4 b' S9 k$ ]诱导 ...
  m  u+ T- W6 r8 q
楼主用的什么抗凝剂来保存脐血啊?一般在室温放了多久才开始分离的?
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18楼
发表于 2013-1-22 09:38 |只看该作者
回复 kiss2346 的帖子
+ c. s2 |' m6 g' b5 n! E) o0 ]! i
0 ~5 d+ ?+ b/ p. O2 C: ]( R非常感谢您的回复。

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19楼
发表于 2013-1-22 09:38 |只看该作者
回复 gejianyun 的帖子
# ?+ m& o/ z: V
( N; p( K7 B1 M8 m换液的时候,我只加了IL-2
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20楼
发表于 2013-1-22 09:40 |只看该作者
回复 wind789 的帖子
1 u8 q& ?* |, b% ], E% g. ?, _# n- X  t( O3 H2 Z
用的是200ml血袋,抗凝剂是枸橼酸钠,采血量大概60~80ml(含28ml抗凝剂),一般室温放置30~60min后开始离心。
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