请教关于脐血CIK细胞增殖团与CD3，CD56双阳性的问题

bloodroses

小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
; u) F3 |# T/ o: `, R诱导方案是INF-γ 1000u/ml, 24小时后加CD3 50ng/ml, IL-2  300U/ml，之后2~3天半量换液，补充IL-2到300U/ml。* o4 ~) X/ e6 A+ k( E
培养基用国产无血清培养基。分离液是Ficoll 1.077。  m# O& w' P% p' q: K
可是养脐血CIK时，分离方法和诱导方案以及培养基都相同。
( w7 g: S( _9 [/ f第3天的时候，可见少量增殖团生成，到第7天检测时，双阳率在0.5%以下，
% c) Z0 y7 ^9 l* S; {- ?之后培养基又用PRMI 1640+10%FBS，以及在培养基中加10%自体血浆。
. I5 c' @* Y7 `2 A( P8 m. h* C$ `6 i6 M( j重复4次试验，都是只见增殖团，流式检测时，双阳率都在1%以下。
8 e# O. E3 r4 z! |4 K恳请高手帮忙分析一下原因啊，谢谢。

liutianhua

回复 bloodroses 的帖子) m5 `' c, k0 e0 U0 u
4 f3 C. Z( V8 W( V% h, t  t
脐血有很多性质与外周血不同，毕竟没有经过阴性筛选和阳性筛选，其实我很怀疑外周血方案用在脐血行不行，因为我也做过，效果时好时坏。

bloodroses

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; G) D% p# r4 h  w& ^6 z3 \9 L
) |) w( \9 S8 {" N# @* i) q谢谢您的回复

莫邪小仙

哎，我的问题和楼主恰好相反，同样的方案用在脐带血上养的很好，而用在外周血上却是一直死亡。。。。

bloodroses

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* l% q5 y4 @4 n6 V$ X  \% S- t+ I4 C1 g
请问脐血CIK诱导方案你用的是什么啊？

莫邪小仙

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& n- Z; L% _  C* ]. S  @1 d$ L  c1 @
和你的方案差不多，只不过24h后除了CD3和IL-2还加了IL-1，而且IL-2的浓度是500，之后也是换液，保证换液后的浓度是1左右。就这样。用这个方案养外周血的却养不好，咱俩的问题颠倒过来了。。。血清都是用的1640+10%FBS

liutianhua

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: x/ \% w# C+ N
$ ]( k  T& y$ R. N: H, C外周血的怎么一直死亡呢，能传个图片吗？

bloodroses

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9 H0 b  t; P0 ~: R' L1 P: Q* Y/ p4 E( {1 }
我的没有加IL-1，而且IL-2的浓度也只有300U

lyd20042004

bloodroses 发表于 2013-1-15 15:45
6 ?1 v9 N( \! C6 l0 z' r- s  y6 v小弟刚刚接触CIK，养外周血CIK时，增殖团的数量和体积都相应增加，第7天双阳率是10%，第14天到了50%。
" t! Q! F$ \% v4 ?$ m$ O诱导 ...

! O. A* P* H3 S9 A双阳率第14天到了50%，请问是是平均还是个例，如果是平均是什莫牌子培养基？

bloodroses

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1 n. R& ]$ Y1 P; ^0 \; i. @/ f目前的数据只是个例
& W7 s4 w4 p) o+ u数据还在积累中，平均值是多少，现在还不好说