求救脐带间充质干细胞----细胞成团

zhanghaifang

我养的间充质干细胞是脐带来源的，原代培养的前两三天细胞贴壁很正常，形态也挺好的，但是到第四天就不对劲了，细胞都聚集在一块，形成了一个个的细胞团，请大虾们给点意见
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wind789

coffee.cat105 发表于 2013-2-5 10:40
! a6 k8 ~; c+ o- P' S' D& p3 V回复 wind789 的帖子4 T2 W5 \# C0 n) z- [4 }

0 f! _* |! X% s6 P你这个换液是怎么换，把旧培养基吸出来再加新的进去吗？有没有爬不出来的？

" |7 E3 A5 h. O# M是的。有部分爬不出来的组织块，看个体差异。但是不会全部都爬不出来。

coffee.cat105

回复 wind789 的帖子; A( S* _; X+ {  a  y% K* m7 j

/ J) N/ n6 X+ s0 O0 g8 D5 l6 I你这个换液是怎么换，把旧培养基吸出来再加新的进去吗？有没有爬不出来的？

wind789

bsx1111 发表于 2013-2-4 21:07
/ I3 Q/ B" W! V; k4 F回复 wind789 的帖子
& q+ n5 v  l$ s; p& v% ]5 S4 e8 @1 f
你说的完全培养基是什么，有血清吗

! v8 `: Q2 [5 p% w含有全部成分的培养基，也可以是无血清培养基啊。

bsx1111

回复 wind789 的帖子) o- Y) _. g7 V3 n; u

  t2 x" c1 r9 R! m% y% t( H& p你说的完全培养基是什么，有血清吗

lovesxj941

回复 bsx1111 的帖子5 }+ ?# }2 z/ o, S" Q. c& W, R
/ Q. b0 `5 K1 b5 G: e- p; s2 C
让细胞密度高一点。然后按照无血清说明书或者更加频繁的进行换液。这样会避免成团。

wind789

笨球球开心 发表于 2013-2-1 18:55
. c; p3 |' ]) G" e: a0 a8 x回复 wind789 的帖子. a2 k9 N7 Q2 I" r
- \( q* h# v! m
步骤是怎样？？

% z- v% H" M# F# W: i剥离华通胶，剪成小块，生理盐水清洗后与完全培养基混合，转移入培养瓶中。我一般是T75中加入1ml组织块+5ml培养基，尽量晃匀组织块。后面4天换一次液，没污染的话平时不动瓶子，安心等细胞爬出来。

bsx1111

回复 lovesxj941 的帖子5 l3 r0 x" [. K! N3 `

' |: S4 b8 A3 ~1 \5 V! _3 a+ z怎样培养才能使无血清培养不成团啊

lovesxj941

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* w- h8 r# C. R0 J& H" P8 b' ~! j9 h) O# D" o3 o$ q: j+ N. v7 T- Y
用无血清培养基培养原代细胞 聚集成团一般原因是营养缺乏。建议换有血清。

bsx1111

我也成团，不知道是什么原因，我用的是无血清培养基，你用的是什么培养基