求救脐带间充质干细胞----细胞成团

zhanghaifang

我养的间充质干细胞是脐带来源的，原代培养的前两三天细胞贴壁很正常，形态也挺好的，但是到第四天就不对劲了，细胞都聚集在一块，形成了一个个的细胞团，请大虾们给点意见* m( h! J6 s/ n3 e9 R. P
  

细胞海洋

建议你上图

wind789

我也碰到过。有一段时间做出来特别容易聚团。过了那段时间，聚团这个现象又重复不出来了。

湖南干细胞

回复 wind789 的帖子1 t, \2 Q* Z% E! a$ x

3 Q" n7 m, G8 j请教做脐带间充质需要用那种酶，多少浓度？我们实验室有胶原酶二型的粉末剂，应该怎么配，

wind789

湖南干细胞 发表于 2013-1-22 09:24
( G6 Z4 ]+ A, O. P/ Z! ]回复 wind789 的帖子- H$ F' J/ y1 W' N/ _; @) q
  @0 s/ _) S3 ~. A1 \4 Z! `
请教做脐带间充质需要用那种酶，多少浓度？我们实验室有胶原酶二型的粉末剂，应该怎么 ...

2 P7 S) \, @4 j4 j' t9 o$ _) {7 a我一般不用酶，直接组织块贴壁培养。

笨球球开心

6 A4 c: W" z) \5 G" F% E! z% @# `; N2 G/ o. S7 u# O/ r
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* F* z; D7 q/ J4 F0 d+ k+ F" S2 e- o2 z" S
步骤是怎样？？

bsx1111

我也成团，不知道是什么原因，我用的是无血清培养基，你用的是什么培养基

lovesxj941

回复 bsx1111 的帖子8 t1 }; D6 }  O2 ^* B  J
) b( r4 ]  G  f' i3 k6 _6 V
用无血清培养基培养原代细胞 聚集成团一般原因是营养缺乏。建议换有血清。

bsx1111

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# z. u+ e. v4 u6 x. h+ f
0 a6 M( V. b' ~0 I怎样培养才能使无血清培养不成团啊

wind789

笨球球开心 发表于 2013-2-1 18:55 * z( j4 g4 e# M, z
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. f1 A5 ]# V8 y! j, {3 G* T3 M6 J' i% G" H
步骤是怎样？？

- K6 H6 h: X1 ?; T9 x剥离华通胶，剪成小块，生理盐水清洗后与完全培养基混合，转移入培养瓶中。我一般是T75中加入1ml组织块+5ml培养基，尽量晃匀组织块。后面4天换一次液，没污染的话平时不动瓶子，安心等细胞爬出来。