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求救脐带间充质干细胞----细胞成团   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-1-15 20:20 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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我养的间充质干细胞是脐带来源的,原代培养的前两三天细胞贴壁很正常,形态也挺好的,但是到第四天就不对劲了,细胞都聚集在一块,形成了一个个的细胞团,请大虾们给点意见% W5 V, d7 o  s4 L
  
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小小研究员

沙发
发表于 2013-1-15 20:53 |只看该作者
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藤椅
发表于 2013-1-21 15:17 |只看该作者
我也碰到过。有一段时间做出来特别容易聚团。过了那段时间,聚团这个现象又重复不出来了。
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板凳
发表于 2013-1-22 09:24 |只看该作者
回复 wind789 的帖子* F0 s, P- ?4 S- k6 v

3 T, V/ d  l- n6 |( [4 G5 k* L请教做脐带间充质需要用那种酶,多少浓度?我们实验室有胶原酶二型的粉末剂,应该怎么配,
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报纸
发表于 2013-1-22 09:33 |只看该作者
湖南干细胞 发表于 2013-1-22 09:24 * K6 `# Q1 `9 [7 D3 R" ^$ R$ X7 S, b
回复 wind789 的帖子
, Z1 O4 J5 g" S3 Q
. p; m: z" y8 v0 `请教做脐带间充质需要用那种酶,多少浓度?我们实验室有胶原酶二型的粉末剂,应该怎么 ...

8 d/ @1 J, u' n5 N0 ^8 H' O9 [我一般不用酶,直接组织块贴壁培养。
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地板
发表于 2013-2-1 18:55 |只看该作者
本帖最后由 笨球球开心 于 2013-2-1 18:56 编辑
0 F/ U) Y7 b1 @& ]3 d/ o
5 i, z8 F0 M4 U& e回复 wind789 的帖子/ W/ f( T$ B: z% j

5 b0 V' n/ b3 Q4 D: u: L步骤是怎样??

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7楼
发表于 2013-2-1 19:07 |只看该作者
我也成团,不知道是什么原因,我用的是无血清培养基,你用的是什么培养基
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8楼
发表于 2013-2-2 16:55 |只看该作者
回复 bsx1111 的帖子
9 N+ i5 R% v+ j, F. c# g5 ?7 j4 V! N$ u& T, t+ a
用无血清培养基培养原代细胞 聚集成团一般原因是营养缺乏。建议换有血清。
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9楼
发表于 2013-2-2 20:26 |只看该作者
回复 lovesxj941 的帖子; I& E9 E- C$ O' T7 K

# l: T; g( ]! v; I8 m( U4 h. M怎样培养才能使无血清培养不成团啊

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10楼
发表于 2013-2-4 09:29 |只看该作者
笨球球开心 发表于 2013-2-1 18:55 3 q- a( l' w7 y9 e8 X7 c& z% K
回复 wind789 的帖子" Y/ L+ {) G" f; y
/ o; U5 Q# e# Q0 n8 {
步骤是怎样??
0 K9 s) ~% [6 Z( u
剥离华通胶,剪成小块,生理盐水清洗后与完全培养基混合,转移入培养瓶中。我一般是T75中加入1ml组织块+5ml培养基,尽量晃匀组织块。后面4天换一次液,没污染的话平时不动瓶子,安心等细胞爬出来。
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